山莨菪堿對心臟驟停大鼠及缺氧-復氧心肌細胞影響的研究.pdf

1、有研究發(fā)現，復蘇中增加腎上腺素的用量，盡管可以增加心腦灌注壓和血液灌流量，但同時可能對心肌和腦組織造成損害，終導致復蘇成功率下降。而山莨菪堿(anisodamine，Ani)具有增加冠脈血流量、改善微循環(huán)、降低血小板聚集、抑制血栓形成、減輕心肌及腦組織的缺血/再灌注損傷等作用。心肺復蘇早期應用Ani干預可能會改善組織的灌注，改善復蘇后心肌及腦組織的功能，減輕腎上腺素的負作用，以期提高復蘇成功率和改善預后，本研究對山茛菪堿在心肺復蘇中的作

2、用進行實驗研究以探討其對缺血心肌細胞的保護作用。
　　 目的在建立一個標準化大鼠心臟驟停及心肺復蘇模型基礎上，應用盲法給藥，觀察山莨菪堿對心臟驟停大鼠心肌及腦組織代謝的影響，并進一步從細胞凋亡觀察山莨菪堿對缺氧/復氧心肌細胞的作用。
　　 方法實驗共4部分：第一部分，成年Sprague-Dawley(SD)大鼠30只，隨機分成兩組，生理鹽水對照組(n=15)，腎上腺素組(n=15)。采用交流電生理刺激儀經食道調搏誘發(fā)心臟

3、驟停模型，5min后開始心肺復蘇，應用自行設計大鼠心臟胸外按壓機進行心臟按壓。觀察心臟驟停類型分布，誘發(fā)成功時間，自主循環(huán)恢復率及復蘇成功率，試驗后尸體解剖觀察食道及心臟有無灼傷，內臟有無破裂。第二部分，模型操作同第一部分，65只SD大鼠隨機分為5組，生理組(n=5)、生理鹽水組(n=15)、腎上腺素組(n=15)、腎上腺素聯合山莨菪堿組(n=15)、山茛菪堿組(n=15)，采用盲法給藥，調搏前靜脈注射2-[18F]氟-2-脫氧-D-葡

4、萄糖(FDG)0.6ml。復蘇后30min內留取部分實驗大鼠心臟及腦組織進行放射性計數，留取靜脈血送檢血漿心房利尿鈉肽。第三部分，在第二部分基礎上留取存活大鼠腦及心肌組織，檢測細胞晚期凋亡及電鏡觀察線粒體損傷情況。第四部份，細胞培養(yǎng)研究：取乳鼠心室肌細胞培養(yǎng)傳一代后分成五組，正常生理對照組、缺氧/復氧組、腎上腺素組、腎上腺素聯合山茛菪堿組、山莨菪堿組，缺氧2h/復氧12h，每組至少3瓶細胞。采用流式細胞儀檢測缺氧/復氧后的細胞凋亡情況，

5、同時用TUNEL法檢測晚期細胞凋亡。RT-PCR法檢測心肌細胞Ml-3受體亞型的表達。
　　 結果1.所有大鼠均誘發(fā)心臟驟停成功，其中心室顫動10例(33.3％)，無脈搏電活動15例(50.0％)，心電靜止5例(16.7％)，誘發(fā)時間60～150s；自主循環(huán)恢復率對照組為6.7％，腎上腺素組為46.6％；復蘇成功率對照組為0，腎上腺素組為33.3％。食道粘膜存在輕度灼傷，心臟未見灼傷，食道及腹腔內臟未見破裂。2.腎上腺素聯合山莨

6、菪堿組復蘇成功率為70％，高于其它各組，其復蘇成功率分別為腎上腺素組33.3％、生理鹽水組0、山莨菪堿組26.7％(P<0.01)。腎上腺素復蘇成功的心臟和腦組織放射性計數均明顯低于腎上腺素聯合山莨菪堿組，分別為心臟(25.71±2.83 vs38.3±7.2，P<0.05)，腦組織(16.06±2.93 vs31.02±2.72，P<0.05)。腎上腺素聯合山莨菪堿組及單純山莨菪堿組復蘇成功大鼠血漿心房利尿鈉肽水平明顯低于腎上腺素組，

7、分別為(1963.1±1096.7，483.6±205.9vs4417.6±2235.9，P<0.05)，但均高于生理組(238.3±190.0，P<0.05)。3.腎上腺素存活組的腦組織凋亡細胞百分數明顯多于正常生理對照組及腎上腺素聯合山莨菪堿組(8.85±1.2 vs0.87±0.25，4.25±1.05，P<0.01)，腎上腺素存活組的心肌組織凋亡細胞百分數明顯多于正常生理對照組及腎上腺素聯合山莨菪堿組(8.15±1.60 vs2

8、.13±0.65，4.07±1.55，P<0.01)。腎上腺素聯合山莨菪堿組復蘇成功大鼠腦及心肌線粒體損傷明顯較腎上腺素組輕。4.細胞培養(yǎng)：缺氧2h/復氧12h，腎上腺素組早期凋亡細胞明顯高于其他各組(P<0.01)，山莨菪堿組及腎上腺素聯合山莨菪堿組早期凋亡細胞低于缺氧/復氧組。腎上腺素組晚期凋亡細胞明顯高于山莨菪堿組(P<0.01)，略低于缺氧/復氧組及腎上腺素聯合山莨菪堿組，但無統計學意義。RT-PCR檢測出心肌細胞M2受體亞型表