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文檔簡介
1、目的:近年來的研究表明:心衰患者周圍血及心肌組織存在TNF-α的明顯增高。TNF-α有負性肌力作用,能夠誘發(fā)心肌細胞的凋亡,參與心衰時心肌重朔,是預測心衰患者死亡的獨立的危險因子。己酮可可堿是甲基黃嘌呤衍生物,一直作為血管擴張劑治療血管性疾病,近來有幾個小規(guī)模的臨床實驗顯示己酮可可堿對心衰患者有益,能夠改善心功能,降低血TNF-α濃度。但該藥直接對心肌細胞的影響尚未見報道,本試驗擬在心肌細胞水平上研究己酮可可堿對TNF-α的作用及其作用
2、機制。 方法:大鼠心肌細胞體外培養(yǎng),實驗分為四組,對照組、100μg/mlPTX組、300μg/mlPTX組、500μg/mlPTX組.采用流式細胞技術、原位末端脫氧核苷酸轉移酶標記法的方法觀察凋亡率。并采用逆轉錄聚合酶鏈式(RT-PCR)測定iNOS,AKT和NF-κBmRNA的含量。 結果:隨著己酮可可堿的濃度的增加,細胞凋亡率顯著降低,流式細胞技術方法檢測的凋亡率由(25.82±1.98)%分別降到(20.78±1
3、.29)%,(15.73±1.29)%,(10.03±2.13)%(p<0.01);TUNEL方法檢測的凋亡率由(25.55±0.88)%分別降到(19.35±1.33)%,(15.00±1.13)%,(10.02±1.58)%(p<0.01)。各PTX組中AKTmRNA和NF-κBmRNA的含量明顯低于對照組(p<0.01),且隨著己酮可可堿濃度的增加逐漸降低(p<0.01);而iNOSmRNA的含量不受影響,各PTX組與對照組相比無
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