甘氨酸對(duì)離體缺氧-復(fù)氧心肌功能、心肌細(xì)胞[Ca~(2+)]_i和TNF-α釋放的影響.pdf

1、　　目的：觀察甘氨酸(glycine,GLY)對(duì)缺氧/復(fù)氧離體心臟心功能、心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣、心肌細(xì)胞存活率和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis fator-α,TNF-α)濃度的影響,進(jìn)一步探討甘氨酸對(duì)心肌缺血-再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)損傷的防治作用及其機(jī)制,為防治缺血性心臟病提供新的思路和方法。
　　方法：第一部分實(shí)驗(yàn)利用Langendorff灌流裝置復(fù)制心肌缺氧/復(fù)氧(hypoxi

2、a/reoxygenation,H/R)模型模擬心肌I/R,觀察GLY對(duì)心功能的影響。將29只SD大鼠隨機(jī)分為4組：①對(duì)照組 ②H/R組 ③0.05% GLY+H/R組 ④GLY對(duì)照組,觀察各組左室收縮壓(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室發(fā)展壓(left ventricular developed pressure,LVDP=LVSP-LVEDP)、左室收縮壓最大上升速率(dp/dt

3、max)和左室舒張壓最大下降速率(dp/dtmin。第二部分利用原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞建立心肌H/R模型,實(shí)驗(yàn)分7組：①對(duì)照組 ②H/R組 ③低濃度甘氨酸(GLY)+H/R組 ④中濃度GLY+H/R組 ⑤較高濃度GLY+H/R組,⑥高濃度GLY+H/R組,⑦高濃度GLY對(duì)照組,觀察心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣、心肌細(xì)胞存活率和TNF-α濃度。
　　結(jié)果：(1)心功能結(jié)果顯示：H/R后各時(shí)間點(diǎn)大鼠心臟的LVSP,LVDP,dp/dtma

4、x,dp/dtmin均低于缺氧前,各指標(biāo)亦低于其余3組并且隨著復(fù)氧時(shí)間的延長(zhǎng)有所回升,直至復(fù)氧結(jié)束時(shí)H/R組LVDP,dp/dtmax,dp/dtmin仍低于其余各組(P<0.01,P<0.05)。GLY+H/R組復(fù)氧后LVSP,LVDP,dp/dtmax,dp/dtmin在各時(shí)點(diǎn)均高于H/R組,各指標(biāo)隨著復(fù)氧時(shí)間的延長(zhǎng)也有所回升。(2)心肌細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示：H/R處理后,心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣的濃度明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。GLY(0

5、.5-2.0)mmol/L能顯著降低H/R心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣升高的程度,并呈劑量依賴關(guān)系,其中GLY(2.0 mmol/L)作用于H/R心肌細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度最接近對(duì)照組游離鈣濃度,明顯低于H/R組(P<0.01)。GLY(2.0 mmol/L)+H/R組心肌細(xì)胞的存活率明顯高于H/R組(P<0.01)、TNF-α的生成明顯低于H/R組(P<0.05)。
　　結(jié)論：(1)一定濃度(0.5-2.0 mmol/L)的GLY,能顯著

6、減輕離體大鼠心臟缺氧后的復(fù)氧損傷,改善缺氧/復(fù)氧心肌的收縮和舒張功能,保護(hù)心臟。(2)一定濃度的GLY能夠降低缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i,抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載,保護(hù)心肌。(3)GLY能夠減少心肌細(xì)胞產(chǎn)生和釋放TNF-α,提高心肌細(xì)胞存活率。(4)GLY可能通過(guò)抑制缺氧暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文甘氨酸對(duì)離體缺氧/復(fù)氧心肌功能、心肌細(xì)胞「C獷十1；和TNF一a釋放的影響/復(fù)氧心肌產(chǎn)生和釋放TNF一。、抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載而減輕心肌細(xì)胞的損傷和死亡