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文檔簡介
1、目的:
在現(xiàn)代社會,關(guān)節(jié)疾病已經(jīng)成為患者致殘,生活質(zhì)量下降和社會醫(yī)療資源消耗的主導因素。在今后幾十年,隨著人口老齡化加劇,骨關(guān)節(jié)炎的影響將越來越大。由于我們對骨關(guān)節(jié)炎的病因、發(fā)病機制、及疾病進展還不甚了解,這直接導致了在治療上缺乏針對性。中醫(yī)藥在治療OA中積累了豐富的經(jīng)驗,筆者導師在臨床上運用消骨痛方取得了顯效。為了探討中醫(yī)藥療效的機制,本課題試圖把中醫(yī)理論與現(xiàn)代認識相結(jié)合,通過建立大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型,觀察ADAMTS及C
2、OMP的表達,探討消骨痛湯治療OA的機制,為中醫(yī)藥治療OA 提供理論依據(jù)。
方法:
本實驗分二部分進行。第一部分:采用改良膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射木瓜蛋白酶法建立OA大鼠模型,并將其隨機分為正常組,模型組,中藥治療組(消骨痛湯組),西藥治療組(雙氯芬酸鈉組),按Mankin骨關(guān)節(jié)炎組織分類法對軟骨進行評分,通過免疫組化方法檢測各組軟骨和滑膜中ADAMTS-7蛋白的表達及變化。第二部分:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
3、檢測各組血清中COMP蛋白表的水平和差異,同時采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測各組軟骨細胞和滑膜細胞中COMP mRNA的表達水平。
結(jié)果:
第一部分:ADAMTS-7在模型組關(guān)節(jié)軟骨和滑膜中的表達與正常組相比,其表達升高,差異有統(tǒng)計學意義:軟骨(p<0.01),滑膜(p<0.05)。中藥治療組與模型組比較,軟骨中ADAMTS-7蛋白的表達低于模型組(p<0.05),而西藥組軟骨ADAMTS-7表
4、達與模型組相比,無統(tǒng)計學意義(p>0.05);兩治療組滑膜中ADAMTS-7的表達均低于模型組(p<0.05)。第二部分:模型組血清COMP水平與正常組相比表達顯著上調(diào)(p<0.01),兩治療組血清COMP蛋白水平均低于模型組(p<0.01)。模型組軟骨和滑膜細胞COMP mRNA的表達和正常組相比是顯著上升的(p<0.01),中藥和西藥治療組軟骨細胞和滑膜細胞COMP基因的表達低模型組:軟骨(p<0.01),滑膜(p<0.05)。
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