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文檔簡(jiǎn)介
1、 目的:觀察健膝丸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎組織形態(tài)學(xué)的影響,探討其治療骨關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)理,為臨床運(yùn)用以及進(jìn)一步探索骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制提供依據(jù)。
方法:將40只大鼠隨機(jī)區(qū)組法分為正常組、模型組、實(shí)驗(yàn)組(健膝丸組)、對(duì)照組(抗骨增生膠囊組),每組10只。正常組假手術(shù)處理,模型組、實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組按照改良 Hulth 方法建立動(dòng)物模型,切斷大鼠右下肢膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)副韌帶、摘除內(nèi)側(cè)半月板及切斷前后交叉韌帶,術(shù)后不固定傷肢,自由活動(dòng)。1 周
2、后開(kāi)始每天強(qiáng)迫大鼠活動(dòng) 0.5小時(shí),連續(xù) 8周,復(fù)制膝骨關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。術(shù)后 1 周在造模的同時(shí)開(kāi)始用藥,實(shí)驗(yàn)組以健膝丸 1.35g/kg 灌胃,對(duì)照組以抗骨增生膠囊0.4725g/kg灌胃,正常對(duì)照組和模型對(duì)照組則給予等體積的0.9%生理鹽水,每日1 次,連續(xù) 8 周。治療 8周后,處死動(dòng)物,解剖右膝關(guān)節(jié),取股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)軟骨及部分軟骨下骨標(biāo)本,分別經(jīng) HE、Masson、Safranin-O 染色,光鏡觀察并行Mankin’s評(píng)分
3、。
結(jié)果:HE 染色顯示,正常組關(guān)節(jié)軟骨和軟骨下骨組織形態(tài)基本正常。模型組軟骨表面粗糙不整,表層軟骨纖維化變性,出現(xiàn)裂隙深達(dá)移行層,軟骨表面糜爛、完全剝落,形成缺損區(qū),軟骨下骨裸露,軟骨細(xì)胞數(shù)量增加明顯,有簇集現(xiàn)象,各層肥大軟骨細(xì)胞增多,出現(xiàn)大量空軟骨陷窩;軟骨細(xì)胞排列紊亂,四層結(jié)構(gòu)分辨不清晰,可見(jiàn)多重潮線或潮線中斷;部分切片可見(jiàn)明顯的軟骨下骨硬化或囊性變形成,邊緣有丘狀隆起的骨贅,骨小梁增粗。實(shí)驗(yàn)組關(guān)節(jié)軟骨破壞較模型組明
4、顯減輕,表面欠光滑,表層軟骨細(xì)胞丟失,可見(jiàn)軟骨層變薄,軟骨膜缺如,表層軟骨纖維化變性,出現(xiàn)淺表裂隙,深層可見(jiàn)肥大軟骨細(xì)胞,出現(xiàn)空軟骨陷窩;細(xì)胞排列尚整齊,四層結(jié)構(gòu)尚清晰,潮線基本完整;無(wú)明顯的軟骨下骨硬化或囊性變。對(duì)照組大體同實(shí)驗(yàn)組,但其比實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)較多的空軟骨陷窩。
Masson三色染色顯示,正常組軟骨基質(zhì)膠原染藍(lán)綠色,著色均勻,向潮線方向染色加深;軟骨下骨板及骨小梁深染綠色,骨膠原深染紅色,呈紅綠相間。模型組軟骨表層變
5、性,軟骨失染。實(shí)驗(yàn)組軟骨表層及移行層染色淺淡,部分區(qū)域染色不均勻,潮線附近有火焰狀升起的紅染。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組相比,潮線附近有火焰狀升起的紅染,顏色較重。
Safranin-o-fast green-iron染色顯示,正常組軟骨蛋白多糖紅染均勻,無(wú)失染;模型組全層軟骨失染;實(shí)驗(yàn)組染色變淡,染色不均勻;對(duì)照組染色較淡,有失染。
Mankin’s評(píng)分結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組、實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組積分顯著增加(P<0
6、.05);與模型組比較,對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組積分減少顯著(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組軟骨組織損傷積分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P>0.05)。
結(jié)論:通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎組織形態(tài)學(xué)觀察,實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組均出現(xiàn)軟骨退變表現(xiàn),與正常組之間存在差別,但與模型組相比,軟骨退變程度較輕,Ⅱ型膠原和蛋白多糖丟失較少,軟骨下骨硬化不明顯。說(shuō)明健膝丸可減少軟骨Ⅱ型膠原和蛋白多糖丟失,減輕關(guān)節(jié)軟骨破壞,減緩軟骨下骨硬化,延緩骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)展進(jìn)程,但
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