補(bǔ)腎活血方對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛及致痛因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　1、通過臨床試驗(yàn)觀察補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊治療肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎的有效性，為補(bǔ)腎活血方應(yīng)用于膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛管理提供臨床依據(jù)。2、通過分子實(shí)驗(yàn)、討補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎患者靜脈血液、膝關(guān)節(jié)滑液致痛因子PGE2、NGF水平以及對(duì)滑膜組織、軟骨組織PGE2、NGF基因表達(dá)的影響，通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探討補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞致痛因子PGE2、NGF和相關(guān)細(xì)胞因子基因表達(dá)的影響，探討補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊治療肝腎不足，筋

2、脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛的作用機(jī)理。
　　方法:
　　1、臨床研究部分
　　選取2016年1月-2016年12月在廣東省第二中醫(yī)院骨科門診就診的患者，進(jìn)行隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，納入符合選擇標(biāo)準(zhǔn)的90例肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎患者，隨機(jī)分為試驗(yàn)組45例和對(duì)照組45例，試驗(yàn)組予口服補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊，對(duì)照組予口服塞來昔布膠囊，并且均在服藥基礎(chǔ)上指導(dǎo)患者進(jìn)行股四頭肌肌力訓(xùn)練。兩組療程均為4周，記錄兩組患者治療前，治療1周、2周、4周的

3、的VAS評(píng)分、WOMAC評(píng)分，記錄兩組患者治療前、治療1月的Lequesne指數(shù)，在服藥4周后進(jìn)行中醫(yī)證候療效評(píng)價(jià)，并記錄試驗(yàn)過程中發(fā)生的不良事件，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，對(duì)補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊治療肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎的有效性和不良事件發(fā)生情況進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。
　　2、實(shí)驗(yàn)研究部分
　　納入符合選擇標(biāo)準(zhǔn)的40例擬行全膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)治療的膝骨關(guān)節(jié)炎患者，分為試驗(yàn)組20例和對(duì)照組20例，術(shù)前1周開始試驗(yàn)組給予補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊口服，對(duì)照組不予

4、服用藥物。術(shù)前收集患者靜脈血液，術(shù)中膝關(guān)節(jié)滑液、病變滑膜組織、股骨髁軟骨組織。靜脈血液離心處理收集血清，然后進(jìn)行ELISA法檢測PGE2、NGF水平，膝關(guān)節(jié)滑液進(jìn)行ELISA法檢測PGE2、NGF水平;病變滑膜組織、股骨髁軟骨組織均分為兩份，一份用于直接進(jìn)行RT-qPCR檢測PGE2、NGF基因表達(dá)，另一份用于進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)，用制備的補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊含藥血清干預(yù)后，進(jìn)行RT-qPCR檢測PGE2、NGF、COX-2、MMP13基因表達(dá)，通

5、過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，探討補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎PGE2、NGF等細(xì)胞因子的影響。
　　結(jié)果:
　　1、臨床研究部分
　　中醫(yī)證候療效:試驗(yàn)組與對(duì)照組總有效率均為93.33％，試驗(yàn)組中醫(yī)證候療效顯著優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　VAS評(píng)分:組間比較，兩組治療前VAS評(píng)分無顯著性差異(P＞0.05);與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組治療1周、治療2周VAS評(píng)分有顯著性差異(P＜0.05);組內(nèi)比較，試驗(yàn)組和對(duì)照組不同治療時(shí)間之間

6、VAS評(píng)分均有顯著性差異(P＜0.05)，兩組治療1周與治療前比較、治療2周與治療1周比較、治療1月與治療2周比較VAS評(píng)分均有顯著性差異(P＜0.05)。治療2周以內(nèi)試驗(yàn)組在改善VAS評(píng)分方面劣于對(duì)照組。
　　WOMAC評(píng)分:組間比較，兩組治療前WOMAC疼痛評(píng)分、僵硬評(píng)分、關(guān)節(jié)功能評(píng)分以及總評(píng)分均無顯著性差異(P＞0.05);WOMAC疼痛評(píng)分方面，與對(duì)照組比較，治療1周、治療2周、治療1月WOMAC疼痛評(píng)分有顯著性差異(P＜

7、0.05)，試驗(yàn)組在改善WOMAC疼痛評(píng)分方面劣于對(duì)照組;WOMAC僵硬評(píng)分方面，兩組WOMAC不同時(shí)間疼痛評(píng)分均無顯著性差異（P＞0.05）;WOMAC關(guān)節(jié)功能評(píng)分方面，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組治療2周、治療1月WOMAC關(guān)節(jié)功能評(píng)分有顯著性差異（P＜0.05），治療2周后試驗(yàn)組在改善WOMAC關(guān)節(jié)功能評(píng)分方面優(yōu)于對(duì)照組;WOMAC總評(píng)分方面，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組治療1周WOMAC總評(píng)分有顯著性差異（P＜0.05）。組內(nèi)比較，兩組治療1周

8、與治療前比較、治療2周與治療1周比較、治療1月與治療2周比較WOMAC疼痛評(píng)分、僵硬評(píng)分、關(guān)節(jié)功能評(píng)分以及總評(píng)分均有顯著性差異(P＜0.05)。
　　Lequesne指數(shù):組內(nèi)比較，治療1療程試驗(yàn)組與對(duì)照組Lequesne指數(shù)均顯著改善（P＜0.05）;組間比較，兩組治療前和治療1療程Lequesne指數(shù)差值無顯著性差異（P＞0.05）。
　　不良事件:治療期間，試驗(yàn)組出現(xiàn)胃腸不適癥狀1例，對(duì)照組出現(xiàn)胃腸道不適3例，兩組不良

9、事件發(fā)生率分別為1/50和3/50。
　　2、實(shí)驗(yàn)研究部分
　　血清ELISA檢測，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組能顯著降低血清PGE2、NGF水平(P＜0.05)。
　　膝關(guān)節(jié)滑液ELISA檢測，試驗(yàn)組與對(duì)照組膝關(guān)節(jié)滑液PGE2、NGF水平無顯著性差異（P＞0.05）。
　　患膝關(guān)節(jié)滑膜組織RT-qPCR檢測，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組能顯著降低滑膜組織PGE2、NGF基因表達(dá)(P＜0.05)。
　　患膝關(guān)節(jié)軟骨組織RT

10、-qPCR檢測，試驗(yàn)組與對(duì)照組軟骨組織PGE2、NGF基因表達(dá)無顯著性差異(P＞0.05)。
　　滑膜細(xì)胞RT-qPCR檢測，與KOA組比較，正常組、補(bǔ)腎強(qiáng)筋組組PGE2、NGF、COX-2、MMP-13基因表達(dá)均有顯著性差異(P＜0.05);與正常組比較，補(bǔ)腎強(qiáng)筋組PGE2、NGF、COX-2、MMP-13基因表達(dá)均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　軟骨細(xì)胞RT-qPCR檢測，與KOA組比較，補(bǔ)腎強(qiáng)筋組PGE2、COX-

11、2、MMP-13基因表達(dá)均有顯著性差異(P＜0.05);與正常組比較，補(bǔ)腎強(qiáng)筋組PGE2、COX-2、MMP-13基因表達(dá)有顯著性差異（P＜0.05）。正常組、KOA組和補(bǔ)腎強(qiáng)筋組之間NGF基因表達(dá)無顯著性差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、臨床研究部分
　　補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊能明顯緩解肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎患者的疼痛評(píng)分，而且從服藥1周起即開始發(fā)揮療效，但其止痛效果弱于塞來昔布膠囊，能明顯改善患者關(guān)節(jié)僵硬（

12、WOMAC僵硬評(píng)分）及關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重程度（Lequesne指數(shù)），其效果與塞來昔布膠囊相當(dāng)，并能改善關(guān)節(jié)活動(dòng)功能（WOMAC關(guān)節(jié)功能評(píng)分），其效果優(yōu)于塞來昔布膠囊。而在中醫(yī)療效方面，補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊與塞來昔布膠囊總有效率相同，均為93.33％，但補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊的中醫(yī)證候療效更佳。兩藥在一療程服藥中不良事件發(fā)生率均較低。
　　2、實(shí)驗(yàn)研究部分
　　服用補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊1周，即能有效降低患者血液中PGE2、NGF水平，降低滑膜組織PGE2、N

13、GF基因表達(dá)，但不能降低膝關(guān)節(jié)滑液PGE2、NGF水平，不能下調(diào)軟骨組織PGE2、NGF基因表達(dá)。治療早期補(bǔ)腎強(qiáng)筋膠囊緩解膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛的作用可能與調(diào)節(jié)血液和滑膜組織P致痛因子GE2、NGF表達(dá)相關(guān)。
　　運(yùn)用補(bǔ)腎強(qiáng)筋含藥血清干預(yù)膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞和軟骨細(xì)胞，能顯著下調(diào)滑膜細(xì)胞PGE2、NGF、COX-2、MMP13基因表達(dá)，下調(diào)軟骨細(xì)胞PGE2、COX-2、MMP13基因表達(dá)。但無論給予何種干預(yù)，軟骨細(xì)胞NGF基因表達(dá)均無明顯改