貝伐單抗聯(lián)合放療對(duì)肺癌裸鼠移植瘤作用的研究.pdf

1、研究背景與目的：
　　肺癌是目前世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。非小細(xì)胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer，NSCLC）約占肺癌總數(shù)的80％~85%，大多數(shù)患者就診時(shí)已處于晚期，主要采用放、化療及靶向治療等綜合治療，因腫瘤巨大和/或放射抗拒等原因，療效往往不理想，5年總生存率約為17%。因而通過(guò)將放療與靶向治療聯(lián)合來(lái)改善放療抵抗、提高放療療效成為目前研究的熱點(diǎn)。
　　貝伐單抗（Bevacizuma

2、b，商品名 Avastin）是一種以血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular EdothelialGrowth Factor，VEGF）為靶點(diǎn)的分子靶向藥物，已經(jīng)被美國(guó)食品與藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)用于治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌、轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌、轉(zhuǎn)移性腎癌等惡性腫瘤。研究表明貝伐單抗具有放射治療增敏的作用。于丹丹等將貝伐單抗與放療聯(lián)合并觀察其對(duì)乳腺癌移植瘤生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用最為顯著，并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組 HIF-1A

3、、VEGF水平明顯降低，提示貝伐單抗可能通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞增殖和減少血管生成，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。另外，一些臨床前研究及臨床試驗(yàn)證明貝伐單抗可以與放射治療聯(lián)合應(yīng)用于膠質(zhì)瘤、骨肉瘤、直腸癌等惡性腫瘤中。但目前貝伐單抗聯(lián)合放射治療應(yīng)用于肺癌中的報(bào)道較少。本研究旨在探討貝伐單抗聯(lián)合放療對(duì)非小細(xì)胞肺癌的作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.細(xì)胞培養(yǎng)及建立動(dòng)物模型將人A549肺癌細(xì)胞置于含10%胎牛血清的RPMI-1640完全

4、培養(yǎng)基中，在37℃、5%CO2條件的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A549細(xì)胞制成5×107/mL單細(xì)胞懸液，取0.1 mL接種于24只裸鼠后腿皮下。
　　2.動(dòng)物分組及處理
　　10天后腫瘤體積約在100～200mm3之間，按腫瘤體積大小隨機(jī)分為對(duì)照組（無(wú)菌生理鹽水注射）、貝伐單抗組（每次注射貝伐單抗10mg/kg，每周1次，共3次）、放療組（5Gy/次，共2次）、貝伐單抗聯(lián)合放療組（聯(lián)用貝伐單抗和放療）。治療過(guò)程中測(cè)量腫瘤

5、長(zhǎng)徑、短徑，并計(jì)算腫瘤體積，繪制生長(zhǎng)曲線，接種后41d處死裸鼠，切取移植瘤組織并稱(chēng)重，計(jì)算抑瘤率。
　　3.免疫組化分析
　　采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組標(biāo)本的腫瘤微血管密度（MVD）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)情況，初步探討貝伐單抗增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌放射敏感性的作用機(jī)制。
　　4.數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計(jì)方法
　　應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)

6、一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.單純放療組及貝伐單抗聯(lián)合放療組移植瘤瘤體生長(zhǎng)與對(duì)照組比較明顯受抑制（P=0.015，P=0.001）；貝伐單抗聯(lián)合放療組較單純放療組生長(zhǎng)雖有抑制，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療結(jié)束后貝伐單抗組和放療組抑瘤率分別為40.3%和59.7%，兩者聯(lián)用抑瘤率達(dá)82.8%。
　　2.對(duì)照組、貝伐單抗組、放療組、貝伐單抗聯(lián)合放療組的

7、MVD值分別為：14.40±5.01、7.87±2.51、12.47±7.00、7.37±4.11。貝伐單抗組與貝伐單抗聯(lián)合放療組MVD值均明顯低于對(duì)照組（P=0.024，P=0.016）。單純放療組與對(duì)照組比較，差異無(wú)顯著性（P=0.477）。
　　3.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示貝伐單抗組及貝伐單抗聯(lián)合放療組 VEGF表達(dá)較對(duì)照組顯著下調(diào)，且聯(lián)合治療組更明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.029，P=0.022）。
　　結(jié)論：