Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞對(duì)結(jié)直腸癌裸鼠移植瘤ADCC作用的研究.pdf

1、目的:觀察抗EGFR單克隆抗體Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞對(duì)不同EGFR表達(dá)水平的人結(jié)直腸癌細(xì)胞LOVO、SW620裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用;探討Cetuximab在結(jié)直腸癌裸鼠體內(nèi)的抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(antibody dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)的抗腫瘤作用。
　　方法:構(gòu)建大腸癌LOVO和SW620細(xì)胞的裸鼠移植瘤模型,隨機(jī)分成6組,每組5只,分別給予:

2、>　?、貾BS;
　?、贑etuximab;
　?、踙IgG;
　?、躈K細(xì)胞;
　?、輍IgG+NK細(xì)胞;
　　⑥Cetuximab+NK細(xì)胞等處理。
　　Cetuximab及hIgG按1mg/kg每周三次腹腔注射給藥,NK細(xì)胞每周一次尾靜脈注射2×106個(gè)細(xì)胞;觀察荷瘤裸鼠活動(dòng)情況及移植瘤生長(zhǎng)變化,每周兩次測(cè)量腫瘤長(zhǎng)、短徑,計(jì)算腫瘤體積,描繪腫瘤生長(zhǎng)曲線;療程結(jié)束3天后處死裸鼠,剝離腫瘤,稱取瘤重

3、,計(jì)算抑瘤率;腫瘤標(biāo)本行HE染色,觀察病理變化,并應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)EGFR及細(xì)胞增殖指標(biāo)Ki-67的表達(dá)情況,同時(shí)行TUNEL染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:1.Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞組對(duì)LOVO移植瘤有顯著生長(zhǎng)抑制作用(P﹤0.05),而其他各組間則無(wú)顯著性差別(P﹥0.05);各組對(duì)SW620移植瘤均無(wú)明顯抑制作用(P﹥0.05);
　　2.EGFR免疫組化顯示:LOVO(+++),SW620(-),從裸鼠

4、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)所選細(xì)胞系EGFR的表達(dá)情況;
　　3.Ki-67免疫組化顯示LOVO移植瘤中Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞組Ki-67的標(biāo)記指數(shù)LI較其他各組有所下降,較PBS對(duì)照組下降最明顯(P﹤0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其他各組間及SW620移植瘤各組間無(wú)明顯差異(P﹥0.05),表明Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞可以抑制LOVO移植瘤細(xì)胞的增殖;
　　4.TUNEL染色顯示,LOVO移植瘤中Cetuximab聯(lián)合NK

5、細(xì)胞組的凋亡指數(shù)AI明顯高于其他各組,同時(shí)單獨(dú)Cetuximab組AI亦高于PBS對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明Cetuximab與NK細(xì)胞聯(lián)合作用可以促進(jìn)LOVO移植瘤細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論:Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞可對(duì)結(jié)直腸癌裸鼠移植瘤發(fā)揮ADCC抗腫瘤作用,并且ADCC作用與腸癌細(xì)胞表面EGFR表達(dá)水平相關(guān),EGFR高表達(dá)者ADCC抗腫瘤效應(yīng)顯著,EGFR不表達(dá)者則不敏感。Cetuximab聯(lián)合NK細(xì)胞生物治療有望成為治