PPAR-α在肺癌中的表達(dá)及其激動(dòng)劑非諾貝特對(duì)肺癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用的研究.pdf

1、一、過氧化物酶體增殖因子激活受體α(PPARα)在人肺癌組織中的表達(dá)
　　目的:檢測(cè)過氧化物酶體增生物激活受體(PPAR-α)在人肺癌組織和非癌肺組織中的表達(dá),探討PPAR-α的表達(dá)與肺癌臨床病理之間的關(guān)系。
　　方法:采用免疫組化的方法分別檢測(cè)13例非癌肺組織和59例肺癌組織中PPAR-α的表達(dá),并通過圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)各組的平均吸光度值。
　　結(jié)果:PPAR-α在肺癌和非癌肺組織中均有表達(dá),且非癌肺組織的吸光度值較肺

2、癌組織的高;各型肺癌中 PPARα表達(dá)從高到低依次為鱗癌、腺癌、大細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌;PPAR-α的表達(dá)與肺癌的分化程度、組織學(xué)類型、術(shù)后TNM分期有關(guān),而與肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。
　　結(jié)論: PPAR-α在肺癌的發(fā)生及進(jìn)展中起重要作用,該受體有望成為未來肺癌治療的新靶點(diǎn)。
　　二、PPARα激動(dòng)劑非諾貝特對(duì)肺癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用的研究
　　目的:探討 PPARα激動(dòng)劑非諾貝特聯(lián)用順鉑對(duì)人肺癌裸鼠抑制瘤的生長(zhǎng)抑制

3、作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法:建立肺癌A549細(xì)胞的荷瘤鼠模型,把荷瘤鼠隨機(jī)分成對(duì)照組(A組)、非諾貝特組(B組)、順鉑組(C組)和兩藥聯(lián)用組(D組),給藥3周,觀察非諾貝特聯(lián)用順鉑在體內(nèi)對(duì)肺癌生長(zhǎng)的抑制作用;增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)和 CD31染色在病理水平檢測(cè)不同給藥組瘤塊增殖率、凋亡率及微血管密度的差異;Western blot技術(shù)檢測(cè)不同給藥組瘤塊組織中PPARα的表達(dá)水平;免疫組化、

4、RT-PCR及Western blot等技術(shù)檢測(cè)不同給藥組瘤塊內(nèi)肺癌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、Survivin、Bcl-2和NF-KB的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.給藥3周后,與對(duì)照組相比,三個(gè)用藥組腫瘤體積均減小(P<0.05),且聯(lián)合用藥組比單藥組減小得更明顯(P<0.05);三個(gè)用藥組抑瘤率分別為:30.68％、50.88%、61.66%,與對(duì)照組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PCNA染色結(jié)果顯示兩藥聯(lián)用

5、組腫瘤細(xì)胞增殖指數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。TUNEL法檢測(cè)結(jié)果示兩藥聯(lián)用組凋亡指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。CD31染色顯示兩藥聯(lián)用組微血管密度低于對(duì)照組(P<0.05),與單用藥組相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.非諾貝特組和兩藥聯(lián)用組中PPARα蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)(P<0.01);免疫組化結(jié)果示三個(gè)用藥組與對(duì)照組相比腫瘤組織中Bcl-2的表達(dá)水平下降,聯(lián)用藥組作用更明顯(P<0.05)。RT-PCR、Western Bl

6、otting結(jié)果示用藥組Caspase-3mRNA和蛋白的表達(dá)增強(qiáng)并出現(xiàn)活性剪切片段;Survivin mRNA、蛋白的表達(dá)和NF-KB蛋白的表達(dá)均降低,聯(lián)合用藥組作用更明顯。
　　結(jié)論:PPARα激動(dòng)劑非諾貝特在體內(nèi)能有效抑制肺癌細(xì)胞生長(zhǎng),聯(lián)用非諾貝特和順鉑進(jìn)一步增強(qiáng)順鉑對(duì)肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng);可能機(jī)制是通過激活 PPARα的方式,激活凋亡蛋白 Caspase-3,下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin和NF-KB的表達(dá),