αPKCι信號通路阻斷劑ATM對人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生長和EMT抑制作用的研究.pdf

1、目的：
　　探討αPKCι信號通路在肝癌細胞EMT中的作用，并為探尋肝癌細胞EMT靶向治療策略打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　本研究構(gòu)建人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型，予以αPKCι特異性阻斷劑ATM治療，記為實驗組，并設(shè)置陰性對照組。觀察并記錄移植瘤體積變化，出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異后，處死小鼠、手術(shù)摘除移植瘤并為腫瘤稱重，統(tǒng)計分析小鼠移植瘤體積及重量改變。然后，使用免疫組織化學(xué)方法檢測移植瘤組織內(nèi)EMT標志物 E-cadheri

2、n、β-catenin和 Vimentin的表達水平的改變，使用蛋白免疫印跡方法檢測移植瘤組織內(nèi)E-cadherin、αPKCι、Erk1/2、p- Erk1/2、Wnt5a表達水平的改變，并對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　通過對裸鼠移植瘤腫瘤生長曲線的分析，可見對照組移植瘤呈遞增性生長，而實驗組移植瘤生長相對緩慢，生長受到抑制，T/C為56％，實驗組與對照組相比，有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。使用免疫組織化學(xué)方

3、法測得裸鼠移植瘤內(nèi)E-cadherin、β-catenin和Vimentin在實驗組中的表達分別為（4.55±0.25）、
　?。?.52±0.70）和（1.22±0.23）；而在對照組中的表達分別為（0.82±0.56）、（1.08±0.22）和（2.97±0.28）；兩組間E-cadherin、β-catenin和Vimentin的表達水平，有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。使用免疫蛋白印跡方法測得裸鼠移植瘤內(nèi)組織內(nèi)E-cadhe

4、rin表達水平增加，p-Erk1/2表達水平降低，Wnt5a表達水平增加；經(jīng)灰度分析，實驗組與對照組之間的E-cadherin、p-Erk1/2、Wnt5a表達量均有顯著差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　αPKCι信號通路抑制劑ATM對于人肝癌移植瘤的生長具有顯著抑制作用；ATM對于人肝癌移植瘤細胞的EMT有抑制作用；Erk1/2蛋白、Wnt5a蛋白可能參與αPKCι信號通路的調(diào)節(jié)；αPKCι信號通路在肝癌細胞EMT中