腸道不同層次對(duì)合縫合與支架法吻合的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究大鼠腸道壁的不同層次之間互相對(duì)合縫合與捆綁式支架法吻合是否安全可行，其腸道吻合口愈合結(jié)果有無差異;采用捆綁式支架法腸吻合有無優(yōu)勢(shì)。
　　方法:以SD大鼠為研究對(duì)象，隨機(jī)分為5組，每組24只大鼠，觀察4個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)（術(shù)后3天、7天、14天、30天），每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠，采用不同層次對(duì)合縫合（漿膜層與漿膜層對(duì)合縫合SM vs SM組、粘膜層與粘膜層對(duì)合縫合MMvs MM組、漿膜層與粘膜層對(duì)合縫合SM vs MM組）、相同層

2、次對(duì)合縫合（單純縫合吻合Control組）以及捆綁式支架法吻合（Stent組）的方式，行大鼠小腸端端吻合術(shù)，對(duì)比各組吻合方式所需的縫合或吻合時(shí)間，術(shù)后一般狀況，術(shù)后腹腔粘連評(píng)分，術(shù)后各個(gè)觀測(cè)點(diǎn)吻合口的大體愈合情況，包含吻合口腸段的造影結(jié)果，吻合口爆破壓，羥脯氨酸含量，吻合口HE染色、Masson染色以及TGF-β1、b-FGF、α-SMA的免疫組化染色，TGF-β1、b-FGF、α-SMA的mRNA的表達(dá)量的RT-PCR測(cè)定等，通過統(tǒng)計(jì)

3、學(xué)數(shù)據(jù)分析結(jié)果，得出結(jié)論。
　　結(jié)果:總共完成120只大鼠的實(shí)驗(yàn)，其中兩只大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中死亡:一只手術(shù)日晚被同籠大鼠咬死，另一只術(shù)中麻醉過量致死，其余大鼠術(shù)后均正常存活。各組大鼠的平均吻合時(shí)間測(cè)定結(jié)果顯示:SM vs SM組、MM vs MM組和SM vs MM組均比Control組所需吻合時(shí)間長(zhǎng)，而Control組比Stent組吻合所需時(shí)間長(zhǎng)，結(jié)果具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），可見支架法吻合方便快速，比傳統(tǒng)的各種手工縫合

4、方法均簡(jiǎn)單，易于掌握并推廣。各組大鼠的平均腹腔粘連評(píng)分結(jié)果顯示:MMvs MM組和Stent組的腹腔粘連評(píng)分高于Control組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明粘膜層與粘膜層對(duì)合縫合以及支架法吻合相對(duì)更容易導(dǎo)致腹腔粘連，但短期內(nèi)不導(dǎo)致梗阻，而漿膜層與漿膜層對(duì)合縫合則腹腔粘連較輕，提示漿膜層外翻的吻合原則可以減少腹腔內(nèi)產(chǎn)生粘連的幾率。各組大鼠的吻合口腸段造影結(jié)果顯示:在術(shù)后30天各組吻合口通暢，均未見明顯狹窄及梗阻，也未見腸瘺發(fā)

5、生，說明腸道的不同層次對(duì)合縫合以及支架法吻合對(duì)大鼠腸道的愈合是安全可行的，不會(huì)導(dǎo)致明顯的腸吻合口瘺以及腸道狹窄和梗阻。吻合口爆破壓結(jié)果顯示:在術(shù)后7天和14天，SM vs SM組、MM vs MM組和SM vs MM組的平均爆破壓均比Control組的要低，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;在術(shù)后3天和術(shù)后30天，各組吻合口的爆破壓與Control組相比無明顯差異（P＞0.05），說明在力學(xué)愈合上，在術(shù)后早期，各種縫合或者吻合方式對(duì)大

6、鼠腸道的力學(xué)性能無明顯影響，在術(shù)后中期開始相同層次對(duì)合縫合法和支架法吻合的方式比其他三種縫合方式在力學(xué)性能上更牢固，但是在后期，各種縫合或者吻合方式均能達(dá)到一致的力學(xué)性能，對(duì)大鼠腸道的愈合結(jié)果不產(chǎn)生影響。吻合口羥脯氨酸含量測(cè)定結(jié)果顯示:每組的平均羥脯氨酸含量隨時(shí)間的增長(zhǎng)逐漸增加;而在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上各組間吻合口羥脯氨酸含量與Control組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0，05），說明各組吻合口膠原蛋白的形成過程基本一致，均隨著時(shí)間的增長(zhǎng)而增加，均

7、能正常愈合，且各種縫合方法及支架法吻合方式對(duì)膠原蛋白量的生成影響不大。吻合口組織切片HE染色和Masson染色結(jié)果顯示:通過對(duì)組織切片評(píng)分量化分析，得出Stent組及Control組相比其余幾組炎癥反應(yīng)輕，愈合開始早，但在術(shù)后30天時(shí)，各組腸吻合口在組織學(xué)上基本愈合一致;而吻合口組織的TGF-β1、b-FGF和α-SMA免疫組化染色顯示TGF-β1和b-FGF的變化較為一致，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)均出現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)，而α-SMA呈現(xiàn)先增長(zhǎng)后下

8、降的趨勢(shì)，各個(gè)組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0，05）;RT-PCR對(duì)吻合口TGF-β1、b-FGF和α-SMA的mRNA含量測(cè)定結(jié)果與免疫組化結(jié)果基本一致;且免疫組化結(jié)果和RT-PCR的結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致，說明在TGF-β1、b-FGF和α-SMA的表達(dá)上，本研究的幾種腸道縫合方法以及捆綁式支架吻合法對(duì)大鼠腸道的愈合無顯著性差異。
　　結(jié)論:
　　1、腸壁不同層次對(duì)合縫合以及支架法吻合對(duì)大鼠腸道的愈合是安全可行的。
　

9、　2、從力學(xué)愈合上來看，腸道壁相同層次對(duì)合縫合和不同層次對(duì)合縫合對(duì)腸道的愈合在早期無明顯影響，中期相同層次對(duì)合縫合具有更好的力學(xué)性能，而后期則各種方式均具有相同的力學(xué)性能。從組織學(xué)愈合上來看，腸道壁相同層次對(duì)合縫合能夠更早開始組織修復(fù)過程，但是在后期幾乎無吻合口愈合的差異，各種縫合方法及支架法吻合愈合結(jié)果一致。
　　3、腸道支架法吻合在腸道愈合過程中在力學(xué)愈合上和組織愈合上與按相同層次對(duì)合縫合的腸道縫合方法基本一致，并且具有吻合方