支架法修復(fù)膽道缺損的動物實驗和初步臨床研究.pdf

1、第一部分，支架法修復(fù)膽道缺損的動物實驗研究
　　目的：探索支架法修復(fù)膽道缺損的可行性和安全性。
　　材料和方法：利用醫(yī)用硅膠管設(shè)計了一種簡易的膽道支架模型。以巴馬小型豬為實驗對象,隨機分為兩組,每組15頭。構(gòu)建膽總管缺損1.0cm的動物模型為實驗組1;構(gòu)建膽總管缺損2.0cm的動物模型為實驗組2。兩實驗組行支架法恢復(fù)膽道連續(xù)性:將設(shè)計的支架與膽管兩端捆綁連接,同時允許支架中間1.0cm或者2.0cm的膽管缺損。術(shù)后觀察動物黃

2、疸和膽漏情況;術(shù)后1,3,6月每個實驗組各處死5頭動物,分別比較動物自身術(shù)前和術(shù)后1,3,6月肝酶(ALT、AST、ALP)和血總膽紅素的變化,觀察兩實驗組大體標(biāo)本、肝臟組織病理切片HE染色、新生膽管組織以及新生膽管組織旁的正常膽管組織病理形態(tài)學(xué)改變:包括HE染色、Masson染色和α-SMA免疫組化;術(shù)后6月兩實驗組隨機抽取動物經(jīng)膽囊行膽管造影。
　　結(jié)果：兩實驗組均順利完成手術(shù)。兩實驗組動物術(shù)后無黃疸。實驗組1動物術(shù)后無膽漏發(fā)

3、生,術(shù)后因應(yīng)激性潰瘍大出血動物死亡1例(7％,1/15);實驗組2術(shù)后因膽漏動物死亡1例(7%,1/15)。兩實驗組動物肝酶(ALT、AST、ALP)和血總膽紅素自身術(shù)前和術(shù)后1,3,6月比較均無顯著性差異(P＞0.05)。術(shù)后1月,兩實驗組新生膽管已覆蓋支架上膽總管缺損部分,但存在充血水腫;鏡下可見散在不規(guī)則的新生膽管上皮細(xì)胞,伴有杯狀細(xì)胞,同時可見大量腺體;膠原纖維增生、排列紊亂。術(shù)后3月,兩實驗組新生膽管充血水腫消退;鏡下可見新生

4、膽管上皮細(xì)胞開始逐漸形成規(guī)則的單層粘膜,仍可見杯狀細(xì)胞和增生的腺體;膠原纖維增生明顯、排列紊亂。術(shù)后6月,兩實驗組新生膽管外觀與正常膽管相同;鏡下可見新生膽管上皮細(xì)胞排列為整齊的單層粘膜,與正常膽管上皮細(xì)胞形態(tài)、排列方式相似,仍可見杯狀細(xì)胞和增生腺體;膠原纖維增生明顯、排列紊亂,部分排列相對有序。實驗組2相同時間點的膠原纖維增生表現(xiàn)同實驗組1,但排列更加紊亂。術(shù)后1,3,6月兩實驗組肝臟切片鏡下未見淤膽和炎性細(xì)胞浸潤。兩實驗組術(shù)后1月分

5、別與術(shù)后3月以及6月相比,α-SMA陽性表達(dá)評分均沒有顯著性差異(P＞0.05);術(shù)后6月α-SMA陽性表達(dá)評分明顯低于術(shù)后3月(P＜0.05)。正常膽管組織鏡下僅觀察到少量的腺體、未見杯狀細(xì)胞;膠原纖維層較薄,纖維排列整齊有序。兩實驗組動物術(shù)后6月經(jīng)膽囊造影提示:膽管和支架捆綁處無造影劑滲漏,肝內(nèi)膽管顯影未見擴張,膽總管引流通暢,十二指腸顯影佳。
　　結(jié)論：在保護膽管血供、實現(xiàn)無張力修復(fù)的前提下,整段缺損2.0cm以內(nèi)的膽總管具

6、有再生形成新生膽管的能力。支架法修復(fù)膽道2.0cm以內(nèi)的缺損是一種操作簡易、安全可行的膽道重建方法。
　　第二部分，支架法延期修復(fù)膽道損傷的動物實驗并臨床應(yīng)用1例
　　目的：探索支架法延期修復(fù)膽道損傷的可行性和安全性。
　　方法：以巴馬小型豬為實驗對象,制成5例膽管損傷后膽漏動物模型。在膽漏動物模型建立48小時后實施支架法重建膽道連續(xù)性。術(shù)后觀察動物膽漏情況;比較重建膽道時和術(shù)后1月動物的肝酶(ALT、AST、ALP)

7、和血總膽紅素的變化情況;術(shù)后1月動物經(jīng)膽囊行膽管造影?；仡櫺苑治瞿懝芗毙匝装Y期行支架法重建膽道的臨床病例1例。
　　結(jié)果：5例膽漏動物模型建立后均順利完成手術(shù)。ALT、AST和血總膽紅素術(shù)后1月比重建膽道時明顯降低(P＜0.05);ALP術(shù)后1月和重建膽道時無顯著性差異(P＞0.05)。術(shù)后無膽漏發(fā)生,術(shù)后1月膽道造影膽管和支架捆綁處未見造影劑滲漏。1例膽管急性炎癥期的患者成功切除膽道腫瘤后行支架法重建膽總管連續(xù)性,術(shù)后黃疸明顯減