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1、甜菜夜蛾核多角體病毒(Spodopteraexiguanuclearpolyhedrosisvirus,SeNPV)可有效防治甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)。目前中山大學(xué)昆蟲學(xué)研究所利用該病毒已成功研制了甜菜夜蛾核多角體病毒殺蟲劑—“蟲瘟二號(hào)”,并實(shí)施產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn),但如何高效低成本增殖該病毒是當(dāng)前產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中亟待解決的問題。由于利用細(xì)胞培養(yǎng)大量增殖病毒成本太高,難以在病毒殺蟲劑大規(guī)模生產(chǎn)中應(yīng)用,因此采取人工半合成
2、飼料飼養(yǎng)寄主昆蟲增殖病毒是當(dāng)前國(guó)內(nèi)外普遍使用的方法。就病毒增殖環(huán)節(jié)而言,主要應(yīng)提高病毒的感染死亡率和單頭寄主病毒含量。影響上述兩個(gè)指標(biāo)的因素很多,包括:昆蟲品系、感染齡期、毒株、接種濃度、飼料、濕度、溫度、光照、收獲病毒時(shí)間等。就寄主昆蟲感染齡期而言,多數(shù)研究表明,最適感染齡期在倒數(shù)第二齡,但在該齡期感染,幼蟲死亡時(shí)的生物量或體重并非最大。因此,如何在寄主獲得最大生物量后使其感染死亡是進(jìn)一步提高病毒增殖產(chǎn)量的關(guān)鍵。保幼激素類似物(Juv
3、enilehormoneanalogue,JHA)是一類具有保幼激素活性的化合物,具有調(diào)控昆蟲變態(tài)和生長(zhǎng)發(fā)育的作用。用JHA處理昆蟲幼蟲,可阻止幼蟲發(fā)生變態(tài),延長(zhǎng)幼蟲期甚至產(chǎn)生超齡幼蟲。鑒于此,本文用JHA處理甜菜夜蛾幼蟲,以延長(zhǎng)幼蟲的歷期并使蟲體相對(duì)增大,從而達(dá)到提高病毒單位產(chǎn)量的目的,為今后利用JHA高效率、低成本增殖甜菜夜蛾核多角體病毒作為殺蟲劑提供理論依據(jù)和方法。 分別用2×106,2×107,2×108PIBs/mL三
4、種濃度的SeNPV感染甜菜夜蛾末齡幼蟲(第5齡),并用保幼激素類似物methoprene8ug處理(處理劑量為8ug/頭),以研究methoprene對(duì)SeNPV增殖的影響。結(jié)果表明:各處理組較對(duì)照組病毒總產(chǎn)量分別提高188%、160%和80%;平均單頭病毒含量分別提高126%、119%和37%;病毒感染死亡率分別提高26%、18%和15%。其中以2×107PIBs/mL感染5齡剛蛻皮甜菜夜蛾幼蟲,并于感染第1天滴加8μgmethopr
5、ene,病毒增殖產(chǎn)量最高,病毒總產(chǎn)量和平均病毒產(chǎn)量分別為4.18×1010PIBs和1.48×109PIBs/頭。以幼蟲的體重變化、取食量、食物消化率、食物轉(zhuǎn)化率、平均每克蟲尸病毒含量為指標(biāo),研究了methoprene和病毒對(duì)宿主消化生理的影響。結(jié)果表明,methoprene處理盡管提高了幼蟲取食量,但更顯著提高了寄主的食物轉(zhuǎn)化率和每克蟲尸的病毒含量。 使用SDS-PAGE及Western-blot方法,分析了methopren
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