腦室內(nèi)低溫對(duì)家兔急性大腦中動(dòng)脈缺血模型HSP70表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本試驗(yàn)對(duì)家兔急性大腦中動(dòng)脈缺血模型進(jìn)行腦室內(nèi)低溫保護(hù)，通過(guò)檢測(cè)低溫組和常溫組家兔大腦中動(dòng)脈缺血腦組織凋亡細(xì)胞和對(duì)熱休克蛋白70(Heat shockprotein 70 HSP70)表達(dá)的觀察，來(lái)探討腦室內(nèi)低溫對(duì)家兔大腦中動(dòng)脈缺血模型細(xì)胞凋亡影響。 方法: 選用4-6個(gè)月齡雄性家兔16只，體重在2.8-3.2Kg，隨機(jī)分為2組：對(duì)照組(常溫生理鹽水)、低溫組(22℃低溫生理鹽水)各8只。應(yīng)用線栓法建立大腦中動(dòng)脈閉塞

2、(MCAO)模型，進(jìn)行腦室內(nèi)穿刺低溫液體灌注亞低溫干預(yù)，根據(jù)sawyer兔腦定位圖譜，于左側(cè)取失狀縫左6mm，冠狀縫前1mm處，牙科鉆鉆開(kāi)露骨，用雙腔靜脈微導(dǎo)管穿刺腦室，雙腔腦室穿刺導(dǎo)管(內(nèi)徑1mm)穿刺兔側(cè)腦室三角區(qū)(由額角向枕角方向穿刺2cm)，固定導(dǎo)管后，導(dǎo)管進(jìn)口接輸液固定導(dǎo)管，以等滲鹽水灌注。導(dǎo)管一端為液體入口，另一端為腦室內(nèi)液體流出口。在室溫24℃下，等溫組輸入等溫(37℃)等滲鹽水，低溫組輸入冷卻的22℃等滲鹽水，緩慢滴注(

3、3-4ml/min滴速持續(xù)滴入)，雙腔管出口接虹吸管，以相同速度持續(xù)引流，持續(xù)3小時(shí)。停止腦室滴注，灌注結(jié)束后縫合切口皮膚。自然復(fù)溫，低溫全過(guò)程維持腦質(zhì)溫度在35±0.5℃，右側(cè)同位置牙科鉆鉆顱骨露出硬腦膜，使用紅外線溫度計(jì)測(cè)溫。術(shù)后動(dòng)物行為觀察：動(dòng)物麻醉蘇醒后，觀察其肢體運(yùn)動(dòng)情況。此后置于室溫飼養(yǎng)，24h后觀察兔行為及肢體癱瘓情況，參照Z(yǔ)eaLongal及Bederson檢查法，進(jìn)行5分制評(píng)分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：0分：無(wú)神經(jīng)損傷體征；1分：

4、病灶對(duì)側(cè)前爪不能完全伸展；2分：除I級(jí)征象外并有癱瘓側(cè)阻力下降；3分：除I級(jí)Ⅱ級(jí)征象外，活動(dòng)時(shí)有向癱瘓側(cè)傾倒；4分：不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失。24小時(shí)后采用SABC方法檢測(cè)各組腦組織HSP70表達(dá)，TUNEL方法檢測(cè)凋亡細(xì)胞。 結(jié)果: 1、術(shù)后24 h時(shí)兔神經(jīng)病學(xué)體征評(píng)分以及動(dòng)物行為觀察：常溫組為(3.1±0.5)分，低溫組為(1.5±0.5)分，經(jīng)t檢驗(yàn)兩組有顯著差異(P<0.05)。常溫組中有6只動(dòng)物出現(xiàn)右側(cè)肢體完全癱

5、瘓，另外2只可以爬行。低溫組中有6只可以爬行，另外2只可以跳躍。 2、腦組織細(xì)胞調(diào)亡和HSP70表達(dá)的檢測(cè)結(jié)果：TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞核中呈現(xiàn)有棕黃色顆粒，HSP70染色細(xì)胞漿著色呈棕黃色。低溫組的TINEL染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和HSP70染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯低于和高于常溫組，差異有顯著意義(P<0.05)。 結(jié)論: 經(jīng)腦室內(nèi)低溫保護(hù)的動(dòng)物偏癱程度輕，缺血區(qū)腦組織內(nèi)出現(xiàn)}{SP70陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較常溫組要多，凋亡細(xì)胞較常溫組