熊去氧膽酸對(duì)肝癌預(yù)防作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的
　　探討熊去氧膽酸(UDCA)預(yù)防肝癌發(fā)生的作用及作用機(jī)制。
　　方法
　　1、培養(yǎng)肝腫瘤細(xì)胞株HepG2、BEL-7402和正常人肝細(xì)胞株L-02。用四氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)UDCA對(duì)HepG2,BEL7402及L-02細(xì)胞的增殖抑制作用；以流式細(xì)胞術(shù)、TUNEL和DNA凝膠電泳法測(cè)定UDCA誘導(dǎo)HepG2、BEL7402及L-02細(xì)胞凋亡的作用和其對(duì)細(xì)胞株增殖周期的影響；通過HE染色和電鏡觀察經(jīng)UDCA處

2、理后細(xì)胞形態(tài)的改變；應(yīng)用RT-PCR、western blot和免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)UDCA對(duì)上述三種細(xì)胞株的bax、bcl-2、c-myc、N-ras、P21和P53基因表達(dá)的影響。
　　2、以二乙基亞硝胺(DEN)建立大鼠的肝癌實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。解剖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,觀察UDCA對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肝癌結(jié)節(jié)數(shù)量的影響；用免疫組織化學(xué)方法,檢查UDCA對(duì)大鼠肝組織GST-P和PCNA細(xì)胞陽性率的影響；以TUNEL方法,檢測(cè)UDCA對(duì)大鼠肝組織細(xì)胞凋亡