環(huán)孢霉素A殼聚糖納米顆粒防治增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實驗研究.pdf

1、目的：評價生物降解性的環(huán)胞霉素A殼聚糖納米顆粒抑制增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferativevitreoretinopathy,PVR)的有效性、安全性及其在玻璃體腔內(nèi)的藥物動力學(xué)。 方法：1.采用離子凝膠法，用殼聚糖溶液與三聚磷酸鹽溶液反應(yīng)制備的殼聚糖納米微粒包載環(huán)孢霉素A，利用透射電鏡表征其徑粒大小，應(yīng)用高效液相色譜儀測定環(huán)孢霉素A的濃度并計算包封率及載藥量。 2.20只健康中華大耳白兔玻璃休腔內(nèi)注入0.4m

2、l富含血小板的血漿(platelet-richplasma，PRP)以制作PVR動物模型。術(shù)后1d隨機(jī)分為4組(每組5只兔10只眼)：A組玻璃體腔內(nèi)注入0.1ml平衡液，B組玻璃體腔內(nèi)注入O.1ml殼聚糖溶液，C組玻璃體腔內(nèi)注入0.1m1環(huán)孢霉素A溶液(含環(huán)孢霉素AO.1mg)，D組玻璃體腔內(nèi)注入O.1ml環(huán)孢霉素A殼聚糖納米粒(含環(huán)孢霉素AO.1mg)。分別于注藥后14d，28d用直接眼底鏡行眼底檢查并記錄PVR的程度。并對各時間點各

3、組間PVR級別用秩和檢驗。注藥后4周取D組實驗兔進(jìn)行眼暗適應(yīng)閃光ERG檢查并取視網(wǎng)膜組織行組織病理學(xué)及透射電鏡檢查。 3.取實驗兔20只分別在植入藥后1、2、3、5、7、9、11、14、21、28天，各取2只兔(含4只眼)，抽取玻璃體用高效液相色譜法檢測環(huán)孢霉素A的藥物濃度。 結(jié)果：1.制得的環(huán)孢霉素A殼聚糖納米顆粒其平均粒徑為146±57nm。環(huán)胞素的包封率為69.23％，載藥量為6.52％。 2.玻璃體腔注藥

4、2周及4周后D組PVR等級均明顯較于A、B、C三組輕，組間差異具有顯著性意義(P<0.05)；而A組與B組、B組與C組之間比較差異無顯著性意義(P＞O.05)，另外A組與C組之間差異有顯著性意義(P<0.05)。D組注藥前與注藥后4周暗適應(yīng)閃光ERGb波振幅的差異無顯著性意義(P＞0.05)；D組注藥后視網(wǎng)膜組織病理及超微結(jié)構(gòu)未發(fā)現(xiàn)明顯異常。 3.環(huán)孢霉素A殼聚糖納米顆粒在體外14d內(nèi)藥物累積釋放比率為81％。在注入玻璃體腔內(nèi)2

5、8d均可檢測到環(huán)孢霉素A，11d時為最高濃度1237.7ng/ml，最小濃度在第28天測為448.5ng/ml。 結(jié)論1.離子凝膠法制備CS納米微粒簡單溫和，不需使用有機(jī)溶劑，在上述反應(yīng)條件下制備，可以得到滿足生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用要求的CS納米微粒。 2.一次性兔眼玻璃體腔注入環(huán)胞霉素A殼聚糖納米顆粒(含環(huán)孢霉素A0.1mg)能明顯抑制延緩PVR的發(fā)生，同時也是是安全的。 3.環(huán)孢霉素A殼聚糖納米顆粒在體外和玻璃體腔均能