干擾素-γ聯(lián)合曲安奈德防治兔增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實驗研究.pdf

1、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferati vevitreo retinopathy，PVR)是視網(wǎng)膜及玻璃體的創(chuàng)傷愈合反應(yīng)[1]，也是孔源性視網(wǎng)膜脫離復(fù)位手術(shù)失敗的常見原因及并發(fā)癥。PVR是牽拉引起的視網(wǎng)膜脫離，往往伴隨著玻璃體后及視網(wǎng)膜前形成的纖維增生膜，其牽拉收縮造成復(fù)位的視網(wǎng)膜再次脫離，使已閉合的視網(wǎng)膜裂孔張開或形成新的裂孔。PVR容易復(fù)發(fā)，且多次手術(shù)亦會對視力造成損害，是臨床上重要的致盲疾病。就PVR發(fā)病機制而言，任何能夠

2、增加眼內(nèi)炎的幾率或能夠使視網(wǎng)膜色素上皮(Retinal pigmentepith elium，RPE)細胞釋放于玻璃體腔的因素均可導(dǎo)致PVR的發(fā)生[2]。據(jù)有關(guān)報導(dǎo)，PVR在孔源性視網(wǎng)膜脫離患者中發(fā)病率為5％～10％，平均為7％[3]。PVR發(fā)生發(fā)展與術(shù)前存在的危險因素有密切聯(lián)系。如，術(shù)前存在PVR，曾有內(nèi)眼手術(shù)史，術(shù)中過度冷凝或光凝，多次手術(shù)，術(shù)中應(yīng)用空氣或惰性氣體，術(shù)后出血及術(shù)后脈絡(luò)膜脫離[4]，復(fù)位手術(shù)失敗等[5]。在了解易導(dǎo)致P

3、VR發(fā)生的危險因素的基礎(chǔ)上，認真選擇手術(shù)適應(yīng)癥并合理應(yīng)用有效的藥物預(yù)防PVR的發(fā)生發(fā)展是眼科工作者需要研究和解決的問題。
　　第一部分:
　　建立增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的動物模型
　　目的:
　　觀察比較兩種方法制作增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變動物模型的效果。
　　方法:
　　12只健康家兔，隨機平均分為三組，雙眼均為實驗眼，第一組（空白對照組）玻璃體腔內(nèi)注射生理鹽水，第二組（血小板模型組）玻璃體腔內(nèi)注射富

4、含血小板的血漿，第三組（巨噬細胞模型組）玻璃體腔內(nèi)注射同種異體巨噬細胞懸液，造模后使用裂隙燈顯微鏡及直接檢眼鏡觀察4周，記錄PVR分級情況。
　　結(jié)果:
　　第4周，巨噬細胞模型組PVR級別高于血小板模型組及空白對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　玻璃體腔內(nèi)注射同種異體巨噬細胞制作PVR動物模型，增生效果優(yōu)于玻璃體腔內(nèi)注射富含血小板的血漿，具有可行性和可重復(fù)性。
　　第二部分:

5、r>　　干擾素-γ抑制增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實驗研究
　　目的:
　　觀察干擾素-γ對增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的抑制作用，了解在PVR進展過程中，干擾素-γ對玻璃體內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)表達的影響。
　　方法:
　　12只健康家兔，隨機平均分為三組，雙眼均為實驗眼，第一組（空白對照組）玻璃體腔內(nèi)注射0.2ml生理鹽水，第二組（模型對照組）玻

6、璃體腔內(nèi)注射0.1ml同種異體巨噬細胞懸液+0.1ml生理鹽水，第三組（干擾素-γ組）玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml同種異體巨噬細胞懸液+0.1ml干擾素-γ溶液(1×104IU)。造模后使用裂隙燈顯微鏡及直接檢眼鏡觀察4周，記錄PVR分級情況;分別于造模后第3天、第7天、第14天、第28天抽取實驗眼0.1ml玻璃體，ELISA法檢測玻璃體中細胞因子TGF-β1濃度。
　　結(jié)果:
　　1.第4周，干擾素-γ組PVR等級低于模型對照

7、組，高于空白對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.在PVR進展期間，家兔玻璃體內(nèi)TGF-β1濃度呈現(xiàn)規(guī)律性變化，先升高后下降;干擾素-γ組TGF-β1濃度低于模型對照組，高于空白對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　干擾素-γ可以抑制PVR的發(fā)展，干擾素-γ能夠抑制玻璃體內(nèi)細胞因子TGF-β1的表達。
　　第三部分:
　　干擾素-γ聯(lián)合曲安奈德防治增生性玻璃視網(wǎng)膜

8、病變的實驗研究
　　目的:
　　觀察干擾素-γ與曲安奈德聯(lián)合應(yīng)用對增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的防治作用，探討兩者聯(lián)合用藥對治療PVR是否具有協(xié)同作用，了解在PVR進展過程中，干擾素-γ對玻璃體內(nèi)血小板衍生生長因子(platelet derived growth factor，PDGF)表達的影響。
　　方法:
　　16只健康家兔，隨機分為四組，每組4只，雙眼均為實驗眼，模型對照組玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml同種異體巨噬細

9、胞懸液+0.1ml生理鹽水，曲安奈德組玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml同種異體巨噬細胞懸液+0.1ml曲安奈德注射液，干擾素-γ組玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml同種異體巨噬細胞懸液+0.1ml干擾素-γ溶液(1×104IU)，聯(lián)合用藥組玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml同種異體巨噬細胞懸液+0.05ml曲安奈德注射液+0.05ml干擾素-γ溶液(0.5×104IU)。造模后使用裂隙燈顯微鏡及直接檢眼鏡觀察4周，記錄PVR分級情況;分別于造模后第3天、第7天、第

10、14天、第28天抽取實驗眼0.1ml玻璃體，ELISA法檢測玻璃體中細胞因子PDGF的濃度;第28天，摘取動物眼球，常規(guī)行石蠟切片、HE染色，觀察視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果:
　　1.第四周，聯(lián)合用藥組PVR級別低于其余三組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;兩單獨用藥組PVR級別低于模型對照組（P＜0.05)，兩組間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.PVR進展期間，家兔玻璃體內(nèi)細胞因子PDGF濃度呈現(xiàn)規(guī)