姜黃素防治增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文姜黃素防治增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究姓名：安建斌申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：馬景學(xué)20090401中文摘要姜黃素分為2 0 、1 5 、1 0g g ／m L 組及空白對照組( 1 0 ％F B S ．D M E M 含O ．5 ‰二甲基亞砜( D M S O ) ) 等4 組；蘇拉明分為4 0 0 、2 0 0 、1 0 0 g g ／m L 組及空白對照組( 1 0 ％F B S ．D M

2、E M ) 等4 組；每組各設(shè)6 個(gè)復(fù)孔，共接種4 塊培養(yǎng)板，加藥后2 4 、4 8 、7 2 及9 6 h 時(shí)隨機(jī)抽取1 塊培養(yǎng)板行，噻唑藍(lán)比色( M T T ) 法檢測兩種藥物對R P E 細(xì)胞增生的抑制率。相關(guān)回歸分析計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的半數(shù)抑制率( I C 5 0 ) 劑量。流式細(xì)胞儀( F C M ) 檢測姜黃素( 1 5r t g ／m L ) 和蘇拉明( 2 0 0l r t g ／m L ) 分別作用7 2 h 后對R P E

3、 細(xì)胞增殖周期的影響。F C M 檢測姜黃素( 1 5 } t g ／m L ) 作用2 4 、4 8 、7 2h 后R P E 細(xì)胞增生細(xì)胞核抗原( P C N A ) 的表達(dá)量。F C M 檢測姜黃素( 1 5 r t g ／m L ) 作用8 、2 4 、4 8 、7 2h 后R P E 細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)鈣離子( C a 2 + ) 和線粒體膜電位( △W m )的變化及R P E 細(xì)胞凋亡率。透射電子顯微鏡觀察姜黃素( 1 5 l a

4、 g ／m L ) 作用4 8 h 后R P E 細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。I m P C R 和W e s t e r n ．b l o t 分別檢測姜黃素( 1 5 g g ／m L ) 作用8 、2 4 、7 2h 后R P E 細(xì)胞內(nèi)凋亡相關(guān)基因B c l ．2 和P 5 3的m R N A 和蛋白表達(dá)量的變化。結(jié)果姜黃素和蘇拉明對R P E 細(xì)胞增生均有明顯地抑制作用，呈時(shí)間和劑量依賴性，兩種藥物在各時(shí)間點(diǎn)的抑制率與對照組相比均明顯升

5、高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( 尸 O ．0 5 ) ，其余各組與對照組相比均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O ．0 5 ) ；R P E 細(xì)胞質(zhì)內(nèi)C a 2 十分別為( 3 9 4 ．1 6 + 2 2 ．4 4 ) 、( 4 2 1 ．6 4 + ．2 4 ．8 5 ) 、( 4 6 9 ．4 3 士2 5 ．1 1 ) 、( 5 1 6 ．6 7 士1 5 ．0 6 ) ，與對照組相比均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( 尸<