miR-21靶向PDCD4影響神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡.pdf

1、Ⅷ洲』0㈣Y1414208，t京協(xié)和管學(xué)院中國(guó)蔣學(xué)甜辱豫|尊士研究生學(xué)位論文北求№和醫(yī)‘畢院研究生院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生論文中文摘要神經(jīng)膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。盡管在過(guò)去的20年中，外科手術(shù)、放療以及化療等醫(yī)療手段不斷進(jìn)步，但是神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后與生存期并未得到明顯的提高。深入了解神經(jīng)膠質(zhì)瘤在侵襲、轉(zhuǎn)移以及凋亡等過(guò)程所涉及的分子機(jī)制，闡明神經(jīng)膠質(zhì)瘤的發(fā)生與發(fā)展機(jī)制，是建立新的神經(jīng)膠質(zhì)瘤分子診斷標(biāo)準(zhǔn)、開(kāi)發(fā)神經(jīng)膠質(zhì)瘤分

2、子治療技術(shù)的理論基礎(chǔ)。微小時(shí)蛆(miIⅢA)是一類內(nèi)源性的非編碼RNA，它們可以直接導(dǎo)致mRNA的降解，或在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控lll】剛A的翻譯。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，miIⅢA參與了細(xì)胞中各種基本生命過(guò)程的調(diào)控，包括細(xì)胞增殖分化、能量代謝和細(xì)胞凋亡等，miRNA的異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，miR21在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中異常高表達(dá)，敲低其表達(dá)能夠有效的激活caspaSe信號(hào)通路，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡。本研究開(kāi)展了miR2l及其靶基因影響

3、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究。首先，我們利用miRallda’1砷搿Sc鋤和Pictar對(duì)miR2l的靶基因進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。隨后，我們結(jié)合OMIM數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)閱讀分析了候選靶基因與神經(jīng)膠質(zhì)瘤和細(xì)胞凋亡的相關(guān)性，篩選出PDCD4、MTAP、SOX5、NTF3、JAGl、RHOB、MAPKl0和NFIB進(jìn)行了后續(xù)的熒光素酶活性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PDCD4、MTAP、SOX5的3’端非編碼區(qū)(3’UTR)中可能帶有miR21的調(diào)控位點(diǎn)。利

4、用miRanda軟件對(duì)PDCD4、MTAP、SOX53’UTR中的miR21結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行分析，并在不同物種中比較了結(jié)合位點(diǎn)序列的保守性，隨后進(jìn)行了結(jié)合位點(diǎn)缺失的熒光素酶活性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)PDCD4、MTAP、SOX53’UTR中帶有miR21結(jié)合位點(diǎn)，受到miR2l的調(diào)控。對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系和病理組織的研究發(fā)現(xiàn)，靶基因PDCD4蛋白表達(dá)水平與miR21的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。利用2’OMeantimiR21敲低神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系T98G中miR