腫瘤細胞中E2F1對ICAM-1的調(diào)控作用及機制的初步探索.pdf

1、ICAM-1編碼一個細胞表面糖蛋白，是一種細胞間粘附分子，它多在內(nèi)皮細胞和免疫細胞中表達。ICAM-1的配體是白細胞粘附分子CD18家族中的兩個成員：即淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1(LFA-1)(CD11a/CD18)和巨噬細胞抗原復(fù)合體-1(Mac-1)(CD11b/CD18)。在炎癥反應(yīng)和腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移過程中，ICAM-1介導(dǎo)的細胞黏附發(fā)揮著極其關(guān)鍵的作用。有研究發(fā)現(xiàn)，病理狀態(tài)下,釋放的一些細胞因子如IFN-γ，IL-1和TNF-α等都

2、可以增加ICAM-1的表達；也有研究發(fā)現(xiàn)，在內(nèi)皮細胞中NF-kB促進ICAM-1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。但是目前關(guān)于ICAM-1基因的具體表達調(diào)控機制仍然不明確。
　　 本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)在前列腺腫瘤細胞系DU145中E2F1和ICAM-1的表達具有相關(guān)性。因此本研究選擇前列腺細胞系PC3和宮頸癌細胞系Hela為實驗材料，進一步研究E2F1和ICAM-1的表達之間的聯(lián)系。我們利用RNA干擾技術(shù)，在這兩種細胞系中分別瞬時敲低E2F1的表達后

3、，發(fā)現(xiàn)ICAM-1的mRNA水平和蛋白表達水平均有所上升。另外，在PC3細胞中瞬時高表達E2F1可使ICAM-1的表達水平顯著下降。這表明在這兩種細胞中，E2F1可能負調(diào)控ICAM-1的表達。
　　 本課題進一步在PC3細胞系和Hela細胞系中對ICAM-1的啟動子進行了分析，研究了ICAM-1啟動子上的兩個潛在的NF-κB結(jié)合位點。通過雙報告基因檢測分析發(fā)現(xiàn)，E2F1可能是通過與NF-kB的相互作用，利用ICAM-1啟動子上的