他汀類藥物對TNF—α誘導(dǎo)MC3T32—E1凋亡和生長抑制的作用.pdf

1、目的：腫瘤壞死因子—α(TNF-α)在骨代謝調(diào)節(jié)方面起著關(guān)鍵性作用。TNF-α水平的升高和成骨細(xì)胞數(shù)目的減少反映了機(jī)體的骨丟失。他汀類藥物對成骨細(xì)胞生長有很強(qiáng)的刺激作用，早期的研究證明他汀類藥物可增強(qiáng)BMP-2基因和蛋白的表達(dá)，但他汀類藥物能否抑制或促進(jìn)成骨細(xì)胞凋亡的研究至今尚未見有報道。文本研究四種他汀藥物對TNF—α誘導(dǎo)的小鼠成骨細(xì)胞(MC3T32-E1)凋亡和生長抑制的影響。 方法：小鼠成骨細(xì)胞MC3T3—E1用DMEM+

2、10％胎牛血清培養(yǎng)，細(xì)胞活性用MTT法測定，Hoechst染色后用熒光顯微鏡觀察典型的致密碎片核和凋亡小體，凋亡細(xì)胞經(jīng)Annexin V/7—AAD雙染色后用流式細(xì)胞儀測定。 結(jié)果： 1.MC3T32-E1用TNF-α(100 ng/ml)處理24、48、72 h后，細(xì)胞活性分別降低7.5％、15％和36％；TNF-α（100 ng/ml)濃度和處理72h可作為實驗的模型條件。 2.他汀藥物類如辛伐他汀、氟伐他汀

3、和阿托伐他汀濃度(10-10～10-7mol/L)處理MC3T3—E172h后明顯促進(jìn)細(xì)胞生長，相反，高濃度的他汀(10-5～10-3mol/L)抑制MC3T3—E1的生長和活性，顯示明顯的細(xì)胞毒反應(yīng)。但羅舒伐他汀無明顯作用。 3.Mc3T3—E1細(xì)胞用辛伐他汀、羅舒伐他汀、氟伐他汀和阿托伐他汀濃度(10-10～10-7mol/L)與 TNF-α(100 ng/ml)共培養(yǎng)72h，他汀類藥物能明顯抑制TNF—α誘導(dǎo)的MC3T3—

4、E1生長抑制。 4.MC3T32-E1用TNF-α(10ng/ml)處理72h后，致密碎片核和凋亡小體明顯增加，用辛伐他汀(10-10～10-7mol/L)預(yù)處理呈濃度依賴抑制TNF—α誘導(dǎo)的MC3T3—E1致密碎片核和凋亡小體增加。 5.MC3T32-E1用TNF-α(10 ng/ml)處理72h后，用Annexin V/7—AAD雙染色后經(jīng)流式細(xì)胞儀測定顯示凋亡細(xì)胞可達(dá)29.2％。辛伐他汀(10-10～10-7mol