他汀類藥物對異丙腎心衰大鼠心肌細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、目的：1）通過異丙腎上腺素誘導(dǎo)制備心力衰竭大鼠模型，觀察其心室肌細(xì)胞凋亡發(fā)生的序列變化（Bcl-2及Bax蛋白的表達），為藥物的有效干預(yù)提供依據(jù)；2）分別予以阿托伐他汀和普伐他汀兩種藥物干預(yù)心力衰竭大鼠，檢測細(xì)胞凋亡指數(shù)及Bcl-2、Bax蛋白的表達水平以觀察他汀類藥物在不同劑量及使用時間上對心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2及Bax的影響；同時檢測TNF-α、心肌羥脯氨酸含量，探討普伐他汀與阿托伐他汀對心力衰竭可能的防治效果的

2、異同，進一步揭示細(xì)胞凋亡與心力衰竭發(fā)病機制及病理生理的關(guān)系，使對慢性心力衰竭的防治更為合理和有效。
　　 方法：1）異丙腎上腺素300mg/kg，皮下注射，間隔24小時重復(fù)1次，共2次。于第1、3、7、14、21、35、49、63天隨機取8只大鼠進行心力衰竭模型建立的序列研究，包括血流動力學(xué)檢測及心肌細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的檢測；2）ISO300mg/kg皮下注射2次，間隔24小時造模。對照組皮下注射生理鹽水0.3ml/

3、100g體重。5周后存活的心衰大鼠隨機分成5組，分別給予生理鹽水（0.5ml/100g）、阿托伐他汀30mg/kg、10mg/kg（生理鹽水溶解）、普伐他汀120mg/kg、40mg/kg每日1次灌胃；對照組給予0.5ml/100g生理鹽水灌胃。繼續(xù)治療4周后進行超聲心動圖、有創(chuàng)血流檢測，并檢測心肌細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白及mRNA的表達，血漿TNF-a含量，心肌羥脯氨酸含量，并計算膠原蛋白含量；3）他汀類藥物預(yù)先干預(yù)SD大鼠3天后，

4、異丙腎上腺素300mg/kg，皮下注射。分別于注射后6小時、72小時監(jiān)測血流動力學(xué)，并檢測Bcl-2、Bax凋亡蛋白表達。
　　 結(jié)果：1）大鼠腹部注射ISO 300mg/kg后，ISO組大鼠體重增加明顯較對照組緩慢。心臟標(biāo)本示ISO組心臟表面黯淡，顏色暗紫，隨著周期的延長，心臟明顯擴大，搏動無力；大鼠死亡率25.6%，異丙腎損傷大鼠心肌后，主動脈平均壓（MAP）于造模后呈逐漸下降趨勢，于第7周后左室內(nèi)最大上升速率（+dp/dt

5、max）明顯減低（P＜0.05），左室內(nèi)最大下降速率（-dp/dtmax）明顯增高（P＜0.05），EF、FS值下降明顯（P＜0.05），心功能明顯受損（P＜0.05），左室質(zhì)量指數(shù)（LVWI）較對照組明顯增加（P＜0.05），提示異丙腎誘導(dǎo)大鼠心力衰竭模型建立；2）他汀類藥物干預(yù)心衰大鼠，阿托伐他汀干預(yù)后EF、FS、dp/dtmax明顯增加，-dp/dtmax明顯降低，LVESD、左室質(zhì)量指數(shù)明顯降低，心肌羥脯氨酸含量降低；兩組間各項

6、指標(biāo)相比，阿托伐他汀干預(yù)30mg/kg組改善左室重構(gòu)及心臟功能效果可能更好。普伐他汀120mg/kg組及40mg/kg組EF、FS、dp/dtmax亦較ISO組增加，-dp/dtmax及LVESD、左室質(zhì)量指數(shù)及心肌羥脯氨酸含量也降低，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義。阿托伐他汀小劑量應(yīng)用可抑制TNF-α，改善炎癥反應(yīng)狀態(tài)，有利于延緩心衰進程。他汀類藥物可阻抑心肌Bax蛋白表達，減輕兒茶酚胺增多所致心肌細(xì)胞內(nèi)Bax/Bcl-2高比例失衡，使之趨于平衡

7、，抑制心肌細(xì)胞凋亡；3）他汀類藥物提前干預(yù)后給予異丙腎注射，6h后左室質(zhì)量指數(shù)升高明顯（P＜0.05），心室率明顯增快（P＜0.05），主動脈平均壓明顯降低（P＜0.05）；±dp/dtmax均低于對照組（P＜0.05），Bax表達明顯增高（P＜0.05）。72h后注射異丙腎各組體重較前明顯減輕（P＜0.01），心室率、主動脈平均壓、±dp/dtmax較6h增高，差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。ISO組、普伐他汀120mg/kg、40

8、mg/kg組左室質(zhì)量增加明顯（P＜0.05）；左室質(zhì)量指數(shù)在注射異丙腎后均較對照組升高（P＜0.05）。Bcl-2、bax表達水平進一步增高（P＜0.05）；bax/bcl-2比值在普伐他汀120mg/kg、40mg/kg組及阿托伐他汀10mg/kg組較對照組明顯增高（P＜0.05），阿托伐他汀30mg/kg組則升高不明顯（P＞0.05）。
　　 結(jié)論：1）異丙腎300mg/kg皮下注射，間隔24h，2次，7周后可誘導(dǎo)大鼠心衰模

9、型建立；2）異丙腎誘導(dǎo)大鼠心衰過程中Bcl-2、Bax序列變化：Bcl-2蛋白表達逐漸增高，達到峰值后Bcl-2表達逐漸降低；Bax蛋白表達亦明顯增高，達到峰值時間略晚于Bcl-2，且此后下降緩慢。Bax/Bcl-2比值在高水平失衡，促進凋亡的發(fā)生，加重心室重構(gòu)，促進心衰的發(fā)生；3）阿托伐他汀30mg/kg、10mg/kg及普伐他汀120mg/kg、40mg/kg分別干預(yù)心衰大鼠，阿托伐他汀治療能明顯改善左室重構(gòu)及心臟功能。以高劑量30

10、mg/kg組改善左室重構(gòu)及心臟功能效果可能更好；4）他汀類藥物通過抑制心肌膠原產(chǎn)生，減輕間質(zhì)纖維變性，抑制TNF-α，改善炎癥反應(yīng)狀態(tài)，阻抑心肌Bax蛋白表達，減輕兒茶酚胺增多所致心肌細(xì)胞內(nèi)Bax/Bcl-2高比例失衡，使之趨于平衡，抑制心肌細(xì)胞凋亡，延緩心衰進展；5）阿托伐他汀預(yù)先干預(yù)對異丙腎損傷大鼠心肌在左室重塑指標(biāo)方面有顯著意義改善，早期應(yīng)用阿托伐他汀可能有益于損傷心肌。其對急性心肌損傷的保護作用可能是通過促進Bcl-2表達增高使