特異性靶向晚期糖基化終產物受體(RAGE)的siRNA降低人類乳腺癌增殖研究.pdf

1、背景:晚期糖基化終產物受體(RAGE)在多種人類癌細胞中高水平表達;然而，它在乳腺癌發(fā)生和增殖過程中的作用尚不清楚。
　　目的:本研究探討了RAGE對于乳腺癌的生物學行為變化的影響。
　　方法:本研究分為體外和體內研究兩個部分。體外研究中，選擇乳腺癌細胞系MDA-MB-231（三陰性）、SK-Br-3（HER2陽性）和MCF-7（ER陽性）作為研究對象，靶向RAGE的siRNA可降低這三種細胞系中RAGE基因的表達。實時熒光

2、定量PCR和Western blot檢測RAGE，NF-κB P65，Cyclin D1和PCNA的表達。MTT法和細胞周期分析法探討了RAGE敲低對乳腺癌細胞增殖和凋亡的影響。另一方面，在體內研究中，通過將21只裸鼠隨機分為六組:分別為RAGE-siRNA組、RAGE-siRNA+Doxorubicin組、Negative RNA+ Doxorubicin組、Doxorubicin組、Negative siRNA組以及空白對照組，通過

3、游標卡尺測量、生物發(fā)光成像(BLI)和磁共振成像(MRI)監(jiān)測移植至裸鼠體內的腫瘤生長情況。隨后通過免疫組化(IHC)分析腫瘤樣本中RAGE，PCNA，CyclinD1和NF-κB p65的表達水平。
　　結果:我們發(fā)現RAGE的表達水平與乳腺癌的嚴重程度相關。此外，下調RAGE表達可以使體外培養(yǎng)的三種乳腺癌細胞系(MDA-MB-231，SK-Br-3和MCF-7)的增殖水平下降并且可抑制移植到裸鼠體內的腫瘤生長。靶向RAGE的s

4、iRNA可將細胞阻滯在G1期并且抑制DNA的合成(P＜0.05)。此外，實時熒光定量PCR，Western blot和免疫組化結果顯示，靶向RAGE的siRNA可降低核轉錄因子NF-κB p65、細胞增殖標記PCNA和CyclinD1的表達。
　　結論:RAGE可在三種乳腺癌亞型特別是侵襲性強的三陰性亞型乳腺癌細胞中過表達。RAGE表達下調的細胞，其增殖能力下降并且能顯著性地抑制腫瘤的生長。然而，RAGE敲低并不能提高腫瘤對阿霉素