晚期糖基化終產(chǎn)物受體胞外段和胞內(nèi)段的克隆、表達(dá)、純化及功能研究.pdf

1、目的:晚期糖基化終產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation end products,RAGE)是一種膜蛋白,屬于免疫球蛋白超家族.人RAGE由404個(gè)氨基酸組成,分別由較大的細(xì)胞外段(321個(gè)氨基酸殘基)、跨膜段(19個(gè)氨基酸殘基)及短的細(xì)胞內(nèi)段(41個(gè)氨基酸殘基)3個(gè)部分構(gòu)成.該研究的目的是分別構(gòu)建和表達(dá)人RAGE的胞外段和胞內(nèi)段,鑒定其生物學(xué)功能,篩選可能與RAGE胞內(nèi)段相互作用的功能蛋白,從而為進(jìn)

2、一步深入研究RAGE的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑奠定基礎(chǔ).結(jié)論1.正確構(gòu)建了人RAGE胞外段和胞內(nèi)段的表達(dá)載體,并成功表達(dá)和純化了人RAGE胞外段和胞內(nèi)段融合蛋白.2.AGE-HSA與細(xì)胞表面受體RAGE相互作用可刺激內(nèi)皮細(xì)胞分泌IL-8,并上調(diào)IL-8 mRNA的表達(dá).3.sRAGE能夠有效阻斷AGE-HSA與RAGE的結(jié)合,抑制AGE-HSA誘導(dǎo)的IL-8生成,其阻斷作用依賴于sRAGE的N-糖基化修飾.4.利用T7噬菌體展示技術(shù),篩選出1