糖基化終產(chǎn)物對人單核細胞EMMPRIN表達的影響.pdf

1、目的：觀察糖基化終產(chǎn)物(advanced glyeation end products.AGEs)對人單核細胞(cultured human monocytes，U937)的細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(extracellularmatrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN)表達的影響及對MMP-2和MMP-9活性的影響。
　　 方法：運用體外制備的糖基化修飾的牛血清白蛋白(AGE-bovin

2、e serum albumiN,AGE-BSA)，以不同濃度(O、50、100、200、400mg/l) AGE-BSA干預(yù)24小時及同一濃度200mg/l）不同時間(0、8、16、24、48h)干預(yù)U937，并用1640組及BSA（200mg/l）組為對照，用RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）檢測各組EMMPRIN的基因表達；Western-blot（蛋白免疫印跡）檢測各組EMMPRIN的蛋白表達。以不同濃度AGE-BSA(50、4

3、00 mg/l)干預(yù)U937 24小時，并用1640組及BSA（400mg/l）組為對照，以明膠酶譜法測定各組上清中MMP-2及MMP-9的活性。
　　 結(jié)果：1、以不同濃度的AGE-BSA干預(yù)U937細胞24小時，50mg/l（1.348+-0.048）、100mg/l (0.923+-0.041)、200mg/l(0.779+-0.052)、400mg/1 (0.499+-0.038) AGE-BSA干預(yù)組的EMMPRIN基

4、因的表達明顯低于1640組（1.551+-0.060）及BSA對照組（1.607+-0.058），并隨著AGE-BSA濃度的增高而逐漸下降(P<0.05)。2、用濃度為200mg/l的AGE-BSA干預(yù)U937細胞8小時(1.373+-0.046)、16小時（1.098+-0.038）、24小時（0.860+-0.042）、48小時（0.663+-0.032），EMMPRJN基因的表達逐漸降低，且低于1640組（1.665+-0.054

5、）及BSA組（1.624+-0.061），并隨著時間的延長而逐漸下降(P<0.05).3、以50mg/1(0.804+-0.024)、100mg/l(0.796+-0.042)、200mg/l(0.789+-0.045)、400mg/l（0.779+-0.028）的AGE-BSA干預(yù)U937 24小時，各組EMMPRIN蛋白表達量之間無明顯差異(P>0.05)。4、以濃度為200mg/l的AGE-BSA干預(yù)U937細胞16小時（0.80

6、9+-0.024）、24小時（0.771+-0.036）、48小時（0.786+-0.045），各組EMMPRIN蛋白表達量之間無明顯差異(P>0.05)。5、以不同濃度的AGE-BSA干預(yù)U937細胞24小時，50mg/l（0.89+-0.124）及400mg/l AGE-BSA（0.775+-0.118）干預(yù)組的MMP-2的酶解量明顯低于1640組（1.185+-0.131）及BSA組（1.11+-0.15）(P<0.05);50m