大孔微載體的制備及原代大鼠肝細(xì)胞的培養(yǎng).pdf

1、雜化人工肝支持系統(tǒng)是目前人工器官研究領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn),是生物醫(yī)學(xué)工程的重要課題之一.雜化人工肝系統(tǒng)的生物部分——肝細(xì)胞的培養(yǎng)是影響其發(fā)展的關(guān)鍵因素.該文的目的在于通過制備性能優(yōu)良的大孔微載體并針對(duì)肝細(xì)胞的特異性受體進(jìn)行糖基化修飾,從而提高肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度和代謝活性,為提高雜化人工肝支持系統(tǒng)在肝功能衰竭治療中的效率奠定基礎(chǔ).制備出粒徑為300~500微米,孔徑50~70微米,孔隙率在86﹪以上,堆密度為1.04g/ml的殼聚糖大孔微載體,并

2、針對(duì)肝細(xì)胞表面的受體因子對(duì)微載體進(jìn)行糖基化修飾.該實(shí)驗(yàn)以大鼠的肝臟為肝細(xì)胞供體,采用改進(jìn)的膠原酶原位灌流法對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行分離,得到了形態(tài)好、存活率高的原代大鼠肝細(xì)胞,一只250g左右的大白鼠可分離出1.08×10<'8>個(gè)肝細(xì)胞,細(xì)胞的存活率為90﹪以上.肝細(xì)胞在修飾后的大孔微載體上保持良好的球形狀態(tài),并以聚集體的形式存在.從代謝活性看,經(jīng)過糖基化修飾的微載體上細(xì)胞的白蛋白分泌和尿素合成量明顯高于未修飾的,最大白蛋白分泌量為54.8m