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1、該試驗采用改良的肝臟原位膠原酶灌流法,成功地分離了大鼠肝細胞,并以原代培養(yǎng)的肝細胞為實驗?zāi)Ｐ?研究不同濃度(0-400mg/L)的氟(氟化鈉)在不同時間段(12,24h)對大鼠肝細胞的毒性及其誘導(dǎo)的細胞凋亡,研究結(jié)果表明:1.采用改良的肝臟原位膠原酶灌流法能有效的分離實驗所需的肝細胞,分離肝細胞數(shù)在2×107/只以上,活率在90％以上;2.采用MTT法檢測氟化鈉對大鼠肝細胞增殖的抑制率,氟化鈉處理12h的半數(shù)抑制率(IC50)為153.
2、85mg/L,24h的IC50為114.43mg/L;3.提取氟化鈉處理的肝細胞的DNA進行瓊脂糖凝膠電泳,可見有明顯的梯狀帶產(chǎn)生,確定細胞發(fā)生凋亡,且具有時間和劑量依賴性;而對照組無梯狀帶出現(xiàn);4.Western blot檢測顯示氟化鈉處理的肝細胞中有凋亡基因bax的表達,且有時間和劑量依賴性.結(jié)論:氟化鈉對大鼠肝細胞即使在低濃度下即有毒性作用,處理12h的IC50為153.85mg/L,24h的IC50為114.43mg/L;DNA
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