輸尿管損傷后瘢痕狹窄形成機制及干預(yù)的實驗研究.pdf

1、目的：構(gòu)建兔輸尿管腔內(nèi)損傷模型,觀察輸尿管損傷前后病理變化及致纖維化因子指標(biāo)高低,研究依那普利對輸尿管損傷后修復(fù)的意義。
　　方法：機平均分為腔內(nèi)機械損傷組和熱損傷組,機械損傷組分為a組和b組,熱損傷組分為c組,d組,機械損傷組兩周(a組)和四周(b組)以及熱損傷組兩周(c組)和四周(d組)后分別取損傷段輸尿管與對側(cè)正常輸尿管2cm,行病理切片和實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real time quantitative polymeras

2、e chain reaction,RT-PCR)觀察損傷輸尿管與正常輸尿管的病理變化及表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factorβ,TGF-β)、結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)、角化生長因子(keratinocyte growth factor,KGF)、Ⅰ型膠原a1(Ⅰcolla

3、gen type a1,COLIa1)、Ⅰ型膠原a2(Ⅰcollagen type a2,COLIa2)、Ⅲ型膠原(Ⅲcollagen,COLⅢ)、纖維連接蛋白(fibrin,FN)等細(xì)胞因子的表達(dá)情況,篩選敏感指標(biāo)。B組(干預(yù)組)實驗取新西蘭長耳兔40只,同樣隨機平均分為腔內(nèi)機械損傷組和熱損傷組,機械損傷組分為一組和二組,熱損傷組分為三組,四組,從實驗開始給予依那普利糖丸10mg/Kg/d口服,直到實驗結(jié)束。機械損傷組兩周(一組)和四

4、周(二組)以及熱損傷組兩周(三組)和四周(四組)后分別取損傷段輸尿管2cm,以同時期A組動物損傷段輸尿管做對照,行蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin stain,HE)染色及RT-PCR分別對比藥物干預(yù)對損傷輸尿管的影響。
　　結(jié)果：兔輸尿管腔內(nèi)機械損傷及熱損傷模型均構(gòu)建成功,A組動物中,HE染色提示輸尿管腔內(nèi)機械損傷及熱損傷均造成了輸尿管粘膜下層及肌層出現(xiàn)不同程度的增厚,成纖維細(xì)胞增生,膠原纖維排列交錯紊亂,而粘膜

5、層及外膜層比較完整,c組較a組纖維化程度高,b組和d組纖維化程度無明顯差異,b組較a組,d組較c組纖維化程度明顯增加;EGF、TGF-β、CTGF、COLIa1、COLIa2、COLⅢ、FN等細(xì)胞因子的表達(dá)量較正常輸尿管顯著升高(均P<0.05),其中,c組較a組表達(dá)量升高(均P<0.05),b組和d組表達(dá)量無明顯變化(均P>0.05),b組較a組,d組較c組表達(dá)量明顯增加(均P<0.05)。KGF各組表達(dá)量無明顯增加(均P>0.05)

6、。B組依那普利干預(yù)研究中,EGF、TGF-β、CTGF、FN的表達(dá)量一組較a組,二組較b組,三組較c組,四組較d組顯著降低(均P<0.05);而COLIa1、COLIa2、COLⅢ表達(dá)量有所下降,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均 P>0.05)。HE染色結(jié)果顯示損傷輸尿管粘膜完整,粘膜下層及肌層仍有不同程度的增厚,一組較a組,二組較b組,三組較c組,四組較d組無明顯改善。
　　結(jié)論：輸尿管腔內(nèi)損傷后所致輸尿管狹窄實質(zhì)為輸尿管粘膜下層及肌層纖

7、維瘢痕形成;EGF、TGF-β、CTGF、COLIa1、COLIa2、COLⅢ、FN等細(xì)胞因子在損傷輸尿管中表達(dá)升高;依那普利可明顯降低EGF、TGF-β、CTGF、FN的表達(dá),對COLIa1、COLIa2、COLⅢ的表達(dá)也有一定抑制作用;熱損傷比機械損傷更容易導(dǎo)致?lián)p傷輸尿管的纖維化,損傷時間越久,纖維化程度越高;依那普利干預(yù)后輸尿管成纖維細(xì)胞的增生并未受到明顯抑制,提示藥物干預(yù)并不能很好的降低輸尿管狹窄的發(fā)生率,避免腔內(nèi)輸尿管損傷,才