MEK抑制劑對急性脊髓損傷后膠質(zhì)瘢痕形成的影響.pdf

1、目的:觀察MEK抑制劑對脊髓損傷后膠質(zhì)瘢痕形成的影響,并討論膠質(zhì)瘢痕形成的機制。
　　 方法:選擇雌性SD大鼠36只。隨機分為假損傷組(A組,n=12)、單純SCI組(B組,n=12)及U0126干預(yù)組(C組,n=12)。以3％戊巴比妥鈉腹腔注射(30mg/kg體重)麻醉大鼠,以大鼠背部最高處定位T12,并正中后路縱形切開,向兩側(cè)牽開椎旁肌,顯露T12棘突及椎板,咬除T12棘突與椎板,形成后方直徑4.0mm的骨窗,充分暴露椎管及

2、硬脊膜,單純SCI組及U0126干預(yù)組用一根重10.0 g圓形金屬沖擊棒通過內(nèi)徑為4.0mm的中空管,距脊髓7cm高處,垂直自由落下,造成脊髓損傷,假損傷組只打開椎板,不打擊脊髓。傷后9天內(nèi)U0126組給予腹腔注射MEK抑制劑U0126(20μg/只,用二甲基亞砜(DMSO)溶解后注射),其余組給予腹腔注射等量的DMSO,每天1次。并在術(shù)后當天、1天、3天、5天、7天、14天、21天、28天內(nèi)對每組大鼠行BBB評分；傷前及傷后當天、14

3、天及28天對大鼠行體感誘發(fā)電位檢測；術(shù)后14天及28天取脊髓標本行HE染色、神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)及波形蛋白(Vim)免疫組化染色等并光鏡下進行觀察,計算陽性細胞數(shù)。所得數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析。
　　 結(jié)果:1、行為學(xué)評分:脊髓損傷后,大鼠雙后肢BBB評分明顯下降,傷后當天評分皆為0,隨著術(shù)后時間的延長,大鼠雙后肢運動功能表現(xiàn)出不同程度的恢復(fù),U0126干預(yù)組恢復(fù)速度較SCI組更快(P<0.05),S

4、CI組術(shù)后28天評分最高可恢復(fù)至15分,而U0126干預(yù)組術(shù)后28天評分最高可恢復(fù)至18分；2、感覺誘發(fā)電位:脊髓損傷后,大鼠雙后肢感覺誘發(fā)電位潛伏期明顯延長,波幅明顯降低,隨著術(shù)后時間的延長,潛伏期及波幅皆表現(xiàn)出不同程度的恢復(fù),U0126干預(yù)后潛伏期及波幅恢復(fù)明顯增快(P<0.05):3、病理組織學(xué):脊髓損傷后,星型膠質(zhì)細胞明顯活化增殖,GFAP及Vim的表達明顯上調(diào)；U0126干預(yù)后可明顯下調(diào)GFAP及Vim的表達(P<0.05),