半乳甘露聚糖檢測對侵襲性曲霉病的臨床價值及大鼠肺曲霉病模型建立.pdf

1、第一部分血清半乳甘露聚糖檢測對血液腫瘤患者侵襲性曲霉病的臨床價值研究
　　 目的:侵襲性曲霉病(IA)是由曲霉菌引起的在血液腫瘤患者中常見的嚴(yán)重機會性感染,早期滲斷困難且伴隨著較高的致死率。本研究旨在初步評價血清半乳甘露聚糖(GM)抗原檢測對于血液腫瘤患者IA的早期診斷和療效評判的價值。
　　 方法:選取2009年1月至2010年2月在我院血液科住院治療的符合國內(nèi)血液病/惡性腫瘤患者侵襲性真菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)宿主因素的127

2、例IA高危患者的402份血清和不具有宿主因素的30例健康志愿者及其他患者的100份血清,采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)法測定血清樣本的GM濃度,同時收集患者的實驗室、組織病理、影像學(xué)及治療效果等資料,依據(jù)我國侵襲性真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn),評價GM測定前后診斷變化和抗真菌治療前后GM濃度變化的意義,并對該實驗的各項評價指標(biāo)進行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:對血液腫瘤患者并發(fā)IA的GM檢測結(jié)果提示將單次I≥0.7或連續(xù)2次I≥0

3、.5作為陽性界值時,敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為92.3％、82.4％、57.1％和97.7％,與試劑盒規(guī)定的血清GM實驗I≥1.5的陽性界值相比靈敏度提高,特異度又無明顯降低,能夠有效區(qū)分臨床診斷和擬診兩個IA級別。加入GM實驗后,臨床診斷病例組由10人增至19人。根據(jù)我們確定的陽性界值標(biāo)準(zhǔn),GM實驗陽性早于痰培養(yǎng)或涂片平均6.1±4.5d(1～11d),早于CT影像學(xué)證據(jù)平均7.2±5.5d(1～15d)?？拐婢委?/p>

4、有效患者的GM水平隨著治療呈波動性下降,無效患者GM水平不變或升高。通過對排除IA的患者進行用藥分析發(fā)現(xiàn)靜脈應(yīng)用哌拉西林-他唑巴坦可使GM實驗的假陽性率升高。而對IA患者應(yīng)用棘白霉素類抗真菌藥物后在治療早期血清GM水平會略有上升,總體呈下降趨勢。GM濃度與患者疾病的預(yù)后具有相關(guān)性。
　　 結(jié)論:血清GM抗原檢測是早期診斷IA的一種有效方法,在陽性檢出率及檢出時間方面均明顯優(yōu)于典型影像學(xué)表現(xiàn)及直接微生物學(xué)證據(jù)。將單次I≥0.7或連

5、續(xù)2次I≥0.5作為陽性界值比單用一種界值敏感度提高,特異度理想。在高危血液腫瘤患者中以GM實驗陽性為起點搶先抗曲霉治療可降低IA病死率,患者經(jīng)有效治療后血清GM濃度可明顯降低,監(jiān)測血清GM濃度的動態(tài)變化具有評判療效的價值。
　　 第二部分實驗大鼠侵襲性肺曲霉病動物模型的建立
　　 目的:建立大鼠免疫抑制侵襲性肺曲霉病動物模型用于相關(guān)基礎(chǔ)與臨床研究。
　　 方法:SD大鼠腹腔注射不同劑量環(huán)磷酰胺或皮下注射一定劑量

6、地塞米松磷酸鈉,建立免疫抑制狀態(tài)后,在大鼠兩鼻孔接種煙曲霉SL1369,觀察各組在接種后不同時間點的行為狀態(tài)和肺組織病理變化。
　　 結(jié)果:三次環(huán)磷酰胺(75+60+60)mg/kg劑量注射組,中性粒細(xì)胞降低達(dá)到預(yù)期水平,連續(xù)5d低于200/μL,濃度約為107/ml的煙曲霉分生孢子懸液接種大鼠,接種后大鼠無死亡且全部發(fā)病,接種菌量適中;肺組織病理觀察在接種3d后曲霉孢子聚集并生成菌絲,肺組織有肉芽腫形成;5-7d時孢子大量繁殖