白血病化療耐藥接觸耐藥模型和粘附耐藥模型的建立及機制初步探討.pdf

1、【目的】收集骨髓標本,檢測其中的Fn表達情況;以急性淋巴系白血病細胞系Jurkat為研究對象,部分模擬急性淋巴細胞白血病的骨髓微環(huán)境,觀察Jurkat在與骨髓基質(zhì)細胞MSCs作用后,對化療藥物吡柔比星藥物敏感性的改變,研究白血病骨髓微環(huán)境介導化療耐藥的部分機制。
　　【方法】收集骨髓標本,檢測不同病例骨髓液標本上清中Fn水平的高低;使用CCK-8的方法檢測單獨培養(yǎng)的Jurkat細胞對化療藥物吡柔比星的藥物敏感性;體外建立急性淋巴系

2、白血病細胞系Jurkat與骨髓基質(zhì)細胞MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型;體外建立Jurkat細胞與Fn作用的粘附耐藥模型;使用CCK-8和流式細胞儀的方法分別檢測Jurkat細胞在MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型、Fn粘附耐藥模型、Jurkat細胞單獨培養(yǎng)模型中的Jurkat細胞對化療藥物吡柔比星在相同藥物濃度作用下細胞凋亡情況的改變;使用流式細胞儀檢測Jurkat細胞在MSCs接觸耐藥模型和Fn粘附耐藥模型中細胞周期阻滯的改變;使用ELISA檢測

3、在MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型中Fn表達水平的高低。
　　【結(jié)果】與正常人相比較,血液腫瘤患者的骨髓標本上清中所分泌的Fn水平明顯的升高,其結(jié)果有統(tǒng)計學意義;ELISA檢測在Jurkat細胞與MSCs共培養(yǎng)的接觸耐藥模型中收集的上清中存在Fn;在與骨髓基質(zhì)細胞MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型中,Jurkat細胞在相同濃度化療藥物吡柔比星作用下,在同一時間點上,細胞凋亡數(shù)目較單獨培養(yǎng)組有明顯下降,結(jié)果具有統(tǒng)計學意義;在Fn作用的粘附模型中,