大鼠肝纖維化形成過(guò)程中Ang(1-7)、MasR的變化.pdf

1、目的：研究大鼠肝纖維化形成過(guò)程中各分期血管緊張素(1-7)[Ang(1-7)]、Mas受體(MasR)的表達(dá)變化。
　　方法：選取清潔級(jí)雄性Wistar大鼠44只，體重(200±10)g，給予大鼠首次皮下注射40％CCl4劑量為5ml/kg，以后每3天1次，劑量為3ml/kg；分別于造模第0、15、30、45天隨機(jī)處死6只，于實(shí)驗(yàn)60、75天隨機(jī)處死10只，取肝左葉組織備用。行HE、Masson染色進(jìn)行病理學(xué)檢查，采用改良Knod

2、ell評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行纖維化程度評(píng)估并分期。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)技術(shù)檢測(cè)Ang(1-7)水平，實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)、蛋白質(zhì)印記法(Western blot)檢測(cè)MasR mRNA及蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)病理結(jié)果：與S0期比較，隨著造模時(shí)間的不斷延長(zhǎng)，大鼠肝纖維化程度出現(xiàn)逐漸加重的趨勢(shì)；S1期可見(jiàn)局限竇周及小葉內(nèi)纖維化；S2期可見(jiàn)匯管區(qū)周圍纖維化；S3期可見(jiàn)小葉內(nèi)纖維間隔形成；S4期可見(jiàn)少量

3、假小葉形成。(2) ELISA結(jié)果：與S0期比較，S1-S3分期Ang(1-7)含量均增高(P＜0.05)，并呈逐漸上升趨勢(shì)，S3-S4期Ang(1-7)含量變化不明顯(P＞0.05)；其中S1、S2、S3期相鄰兩組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但S4期與S3期差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3) MasR mRNA及其蛋白的檢測(cè)結(jié)果：與S0期比較，S1-S3期MasR mRNA及其蛋白的表達(dá)水平均增高(P＜0.05)，S3-S4期MasR mRNA及

4、其蛋白的表達(dá)水平變化不明顯(P＞0.05)；其中S1、S2、S3期相鄰兩組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但S4期與S3期差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：Ang(1-7)、MasR均參與肝纖維化的發(fā)生發(fā)展。隨著大鼠肝纖維化的進(jìn)展，在S0-S3期，RAS被激活，經(jīng)典軸與新軸各組分表達(dá)均增強(qiáng)，兩軸相互抗衡，共同維持肝臟的穩(wěn)態(tài)平衡；在S3-S4期，由于肝細(xì)胞損傷嚴(yán)重，引起細(xì)胞外基質(zhì)大量沉積，從而導(dǎo)致纖維間隔形成加速，新軸各組分表達(dá)受抑制，繼而發(fā)