骨調(diào)素在大鼠酒精性肝纖維化形成過程中的作用.pdf

1、目的:通過觀察酒精性肝纖維化形成過程中肝組織內(nèi)骨調(diào)素(Osteopontin、OPN)、CD68、CD44s、α-SMA變化規(guī)律及其相互關(guān)系,初步探討骨調(diào)素在酒精性肝纖維化形成過程中的作用及其機制.方法:用56％酒精-玉米油-吡唑混合液灌胃制造酒精性肝纖維化大鼠模型,選用純系Sprague-Dawley雄性大鼠66只,體重在180g~200 g之間,56％酒精選用食用酒精配制而成.吡唑為Sigma公司產(chǎn)品,由北京中山生物公司購得.將大鼠

2、隨機分成6組(每組11只),A組為正常對照組,予以正常飲食.B組、C組、D組、E組、F組大鼠每天清早用56％酒精-玉米油-吡唑混合液灌胃.另外間斷給予高脂飼料.其中56％酒精的攝入量為8g/kg/d~12 g/kg/d(第1-4周8g/kg/d、第5-8周10g/kg/d、第9-16周12g/kg/d),隨時間的延長而遞增;玉米油的攝入量為2g/kg/d;吡唑的攝入量為24 mg/kg/d.造模過程中要不斷觀察動物一般狀況及體重的變化,

3、并每周稱重一次,根據(jù)體重調(diào)整酒精、玉米油、吡唑的攝入量.B組、C組、D組、E組、F組分別于灌胃2周、4周、8周、12周、16周后行股靜脈采血,處死大鼠,并留取肝組織標(biāo)本,分別測定肝功能(ALT、AST)、血清肝纖維化指標(biāo)(HA、LN、CⅣ);并作肝組織常規(guī)HE、Masson膠原染色及通過免疫組化染色、原位雜交技術(shù)動態(tài)觀察肝組織中骨調(diào)素、CD68、α-SMA、CD44s表達(dá)、分布狀況、定量和相關(guān)分析.結(jié)論:在酒精性肝纖維化大鼠模型中,OP