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文檔簡介
1、目的:
①探討rhIL-24蛋白與順鉑聯(lián)合體外對人卵巢癌SKOV3細胞、人卵巢癌耐順鉑株SKOV3/ddp細胞的抑制效應;
?、谔接憆hIL-24蛋白聯(lián)合順鉑體外誘導人卵巢癌SKOV3細胞、人卵巢癌耐順鉑株SKOV3/ddp細胞凋亡效應、細胞周期及凋亡基因的變化;
③探討腺病毒介導的白細胞介素-24基因與順鉑聯(lián)合體外誘導人卵巢癌SKOV3細胞的抑制效應及細胞凋亡情況變化。
方法:
?、儆胷h
2、IL-24、DDP及rhIL-24+DDP作用于SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞,用Ad-hIL-24、DDP及Ad-hIL-24+DDP作用于SKOV3細胞抑制細胞生長;
②應用 CCK-8法檢測SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞增殖情況,計算抑制率;
③應用流式細胞儀檢測SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞凋亡及細胞周期的變化;
?、軕枚嗷蜻z傳表達分析SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞
3、凋亡多基因的變化。
結(jié)果:
?、?SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞在適宜條件下培養(yǎng)于第3天進入對數(shù)生長期;
?、?rhIL-24蛋白能抑制SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞生長,48小時的抑制率分別為30.7%、21.8%,對正常細胞無毒性作用;聯(lián)合 DDP組抑制率分別為35.3%、32.6%,優(yōu)于單獨用藥組,rhIL-24蛋白具有化療增敏效應;
?、哿魇郊毎麅x檢測rhIL-24、DDP和rh
4、IL-24+DDP各組凋亡率分別與陰性對照組比較,差異有顯著性意義;細胞周期檢測中,rhIL-24作用SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞,分別引起G2期阻滯,G2期及S期阻滯。
?、?rhIL-24蛋白對于SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞具有上調(diào)Bax,下調(diào)Bcl-2,下調(diào)survivin,激活caspase3,上調(diào)抑癌基因Rb等凋亡相關基因,聯(lián)合DDP組中作用效果更加顯著。
?、?Ad-hIL-24能抑制SK
5、OV3細胞的生長,且聯(lián)合用藥之后對細胞生長抑制率明顯優(yōu)于單獨用藥組,Ad-hIL-24具有化療增敏效應。
結(jié)論:
?、?rhIL-24蛋白及Ad-hIL-24均能抑制SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞的體外生長,分別聯(lián)合DDP后效果優(yōu)于單獨用藥組,具有化療增敏效應,同時能誘導SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞凋亡。
② rhIL-24蛋白可影響SKOV3細胞、SKOV3/ddp細胞的細胞周期,且能引起
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