性激素與促性腺激素對卵巢癌SKOV3、OVCAR-3細(xì)胞體外生長的調(diào)控及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　 卵巢癌的發(fā)病機(jī)制尚不明確，生殖激素對卵巢癌發(fā)生發(fā)展的影響一直存在爭議，本實(shí)驗(yàn)研究生殖激素對卵巢癌細(xì)胞株的作用及可能機(jī)制，為探討生殖激素在臨床對卵巢癌的發(fā)生發(fā)展和對預(yù)后的影響、內(nèi)分泌輔助治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 將不同濃度雌激素(E)、孕激素(P)、人絨毛促性腺激素(HCG)作用于卵巢癌細(xì)胞株SKOV3、OVCAR-3，采用不同的實(shí)驗(yàn)方法觀察細(xì)胞株的生長狀況：(1)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)：利用四甲

2、基偶氮唑蘭(MTT)比色法檢測細(xì)胞在24、48、72h的增殖情況；(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測用藥后細(xì)胞早期凋亡率及細(xì)胞周期的改變；(3)實(shí)時熒光定量PCR檢測兩細(xì)胞株雌激素受體(ERα、ERβ)、孕激素受體(PRA、PRB)、人絨毛促性腺激素受體(LHCG)mRNA表達(dá)的差異，及用藥后各組細(xì)胞EGFR、Bcl-2、BaxmRNA的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 (1)各濃度的P和濃度為10-4mol/L的E對卵巢癌SKOV3、

3、OVCAR-3細(xì)胞增殖均有抑制作用，且該抑制作用呈現(xiàn)時間、劑量依賴性，各濃度的HCG和濃度≤10-6mol/L的E對細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，促進(jìn)作用呈時間依賴性；(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn)：10-4mol/LP作用SKOV3細(xì)胞72h后大量細(xì)胞阻滯在G0/G1期，10-4mol/L的E作用SKOV3細(xì)胞72h后細(xì)胞周期分布以S期為主，濃度為750U/ml的HCG和10-6mol/L的E作用細(xì)胞72h細(xì)胞周期分布G2/M期略增多；(3)

4、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡發(fā)現(xiàn)：濃度為10-4mol/LP和10-4mol/L的E可促進(jìn)SKOV3細(xì)胞凋亡，與對照組相比差異顯著(P＜0.05)，用藥48h凋亡率分別為20％和50%；(4)ERa高表達(dá)的細(xì)胞株SKOV3對各濃度E的作用效果比低表達(dá)的OVCAR-3細(xì)胞更明顯，PRB/PRA的比值高的細(xì)胞株OVCAR-3對各濃度P的作用效果較比值低的SKOV3細(xì)胞表現(xiàn)更顯著，LHCGR高表達(dá)的和低表達(dá)的SKOV3用各濃度HCG48h后與對照組

5、相比增殖顯著，OVCAR-3增殖更顯著(P＜0.01)，用藥72h兩細(xì)胞株均增殖顯著(P＜0.01)，且兩細(xì)胞株存活率無明顯差異；濃度為10-4mol/L的P和10-4mol/L的E作用SKOV3細(xì)胞72h，其EGFR、Bcl-2mRNA表達(dá)量與對照組相比顯著下調(diào)(P＜0.01)，BaxmRNA上調(diào)無統(tǒng)計學(xué)意義；濃度為750U/ml的HCG和10-6mol/L的E作用細(xì)胞72h其EGFR、Bcl-2mRNA表達(dá)量均上調(diào)顯著(P＜0.05

6、)，BaxmRNA上調(diào)無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 P和高濃度的E能抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能是通過將細(xì)胞阻分別阻滯于G0/G1期、S期，下調(diào)EGFR和Bcl-2的表達(dá)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)的。HCG和低濃度的E能刺激卵巢癌細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能是通過上調(diào)EGFR和Bcl-2的表達(dá)而抑制細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)的。ERα可能為E作用于卵巢癌細(xì)胞的主要受體；P可能主要通過PRB來發(fā)揮其抑制卵巢癌細(xì)胞生長的作用；LHCG除了