腸部分切除吻合術對豚鼠小腸cajal間質(zhì)細胞的影響.pdf

1、目的:通過制作豚鼠十二指腸部分切除吻合術模型,結合免疫組化、免疫熒光、肌電活動記錄等方法觀察cajal間質(zhì)細胞在修復過程中的數(shù)量、分布及生長情況,了解cajal間質(zhì)細胞的突起能否通過生長延長重新形成細胞網(wǎng)絡,探討cajal間質(zhì)細胞的自主節(jié)律性;同時探討藥物甲磺酸伊馬替尼是否對cajal間質(zhì)細胞的生長和肌電活動產(chǎn)生影響,腸蠕動功能是否能夠得到恢復,最終為防治和治療胃腸運動功能障礙性疾病提供實驗依據(jù)。
　　方法:1、動物分組:選用90

2、只健康雄性清潔級豚鼠,體重200~250g。動物隨機分成兩組、A組正常對照組(10只)。B組為手術組(80只)分為術后自由喂養(yǎng)組和術后給藥兩組,每組40只。2、模型建立與取材:給予戊巴比妥鈉腹腔注射進行動物麻醉實施十二指腸部分切除吻合術,術后各組均按7、15、30、50天分別處死后,取吻合部位腸管。3、組織病理檢查:麻醉后取出吻合部位經(jīng)HE及免疫組化和免疫熒光染色后,光鏡下觀察記錄。4、肌電活動檢測:麻醉后取出吻合部位,將電極插入肌層,

3、通過BL-420系統(tǒng)檢測腸道肌電活動情況。
　　結果:1.術后動態(tài)觀察吻合處生長情況:肉眼觀察未見粘連、感染、梗阻、出血及瘺口,吻合口頭端和尾端腸管末見狹窄或膨脹。縱行切片經(jīng)HE染色光鏡下觀察,正常對照組可見正常的十二指腸縱行結構,各層組織清晰。手術組十二指腸吻合部位可見吻合口腸腔面為粘膜上皮覆蓋,漿膜面為結締組織所覆蓋,吻合部位也可見較多的結締組織,內(nèi)含大量膠原纖維、成纖維細胞及毛細血管,但未見明顯的炎性細胞侵潤,腸壁平滑肌層結

4、構紊亂。2.術后cajal間質(zhì)細胞的再生情況?免疫組化K1T陽性細胞數(shù)量(個/400倍鏡下):正常對照組(16.1±0.93);術后7天組(1.32±0.21);給藥7天組(1.3±0.17);術后15天組(2.71±0.29);給藥15天組(1.34±0.11);術后30天組(6.99±0.98);給藥30天組(6.14±0.82);術后50天組(11.29±1.42);給藥50天組(8.06±1.14);?免疫熒光K1T陽性細胞數(shù)量

5、(個/400倍鏡下):正常對照組(9.49±0.66);術后7天組(2.28±0.64);給藥7天組(1.41±0.22);術后15天組(2.41±0.62);給藥15天組(2.23±0.5);術后30天組(6.19±0.44);給藥30天組(5.56±0.6);術后50天組(8.31±0.77);給藥50天組(7.72±0.72)。3.肌電活動記錄:正常對照組波幅(31.47±0.84)μV頻率(17.52±0.55)次/min;術后

6、7天組波幅(25.48±0.74)μV頻率(13.66±0.62)次/min;給藥7天組波幅(22.97±0.62)μV頻率(12.37±1.24)次/min;術后15天組波幅(30.89±0.78)μV頻率(15.25±0.97)次/min;給藥15天組波幅(29.23±0.66)μV頻率(14.02±0.62)次/min;術后30天組波幅(31.63±0.56)μV頻率(16.66±0.95)次/min;給藥30天組波幅(31.06

7、±0.85)μV頻率(17.26±0.62)次/min;術后50天組波幅(31.06±0.9)μV頻率17.25±0.62次/min;給藥50天組波幅(31.28±0.58)μV頻率(16.92±0.48)次/min。
　　結論:豚鼠行小腸部分切除吻合術后,能夠減慢腸道的自發(fā)節(jié)律性活動。但隨著吻合口的愈合,發(fā)現(xiàn)Cajal間質(zhì)細胞具有再生的能力,能夠修復受損細胞網(wǎng)絡的延續(xù)性和完整性,腸道自發(fā)節(jié)律性活動可以得到恢復。而且藥物甲磺酸伊馬