豚鼠壺腹部Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察.pdf

1、目的：
　　自1887年Oddi括約肌(Sphincter of Oddi，SO)被發(fā)現(xiàn)以來，人們對(duì)其結(jié)構(gòu)及功能的認(rèn)識(shí)也不斷深入，且清楚地認(rèn)識(shí)到其對(duì)膽胰正常功能的維持具有重要的作用。我們?cè)谇捌诘囊幌盗醒芯堪l(fā)現(xiàn)SO的解剖及功能異常與多種膽胰疾病有關(guān)，如原發(fā)膽管色素結(jié)石、膽囊切除術(shù)后綜合征、先天性膽胰管合流異常、急性胰腺炎及Oddi括約肌功能障礙（Sphincter of Oddi Dysfunction，SOD）等。
　　SO

2、的自主動(dòng)力本質(zhì)上是肌源性的。SO處存在多種神經(jīng)以調(diào)節(jié)其運(yùn)動(dòng)，同時(shí)協(xié)調(diào)SO運(yùn)動(dòng)與十二指腸，膽囊和胃的運(yùn)動(dòng)。SO動(dòng)力的改變可能是來自于神經(jīng)和生物活性物質(zhì)在平滑肌水平上的信號(hào)的整合。SO中興奮的起源和傳導(dǎo)機(jī)制仍不清楚。SO動(dòng)作電位的產(chǎn)生，同步化和協(xié)調(diào)化以及相應(yīng)的收縮活動(dòng)是否涉及一種特殊的細(xì)胞或是SO細(xì)胞的內(nèi)在起搏機(jī)制仍不清楚。Cajal間質(zhì)細(xì)胞(Interstitial Cells ofCajal，ICCs)是胃腸道的起搏細(xì)胞，它能產(chǎn)生自發(fā)性

3、電慢波、參與神經(jīng)信號(hào)的整合與傳遞，對(duì)胃腸平滑肌節(jié)律性運(yùn)動(dòng)具有重要調(diào)控作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，在胃腸道外的一些器官，如膽囊、膽道中亦存存在Cajal樣細(xì)胞(Interstitial Cajal-likeCells，ICLCs)。與胃腸道ICCs相似，這些器官的ICLCs能產(chǎn)生自發(fā)節(jié)律性電活動(dòng)而且對(duì)節(jié)律性運(yùn)動(dòng)具有重要調(diào)控作用。
　　本研究擬利用免疫組織熒光染色方法、透射電鏡成像技術(shù)研究SO中ICLCs的形態(tài)學(xué)特征以及其在調(diào)控SO運(yùn)動(dòng)中

4、的作用，探討ICLCs在調(diào)控SO運(yùn)動(dòng)以及在SOD發(fā)病中的作用，為明確SO運(yùn)動(dòng)機(jī)理及治療SOD提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　(1)制備豚鼠壺腹部組織冰凍切片，進(jìn)行免疫熒光雙重染色，使用酪氨酸激酶受體(c-kit)作為ICLCs的標(biāo)記物，SMA標(biāo)記SO中平滑肌細(xì)胞，PGP9.5標(biāo)記神經(jīng)纖維，分別對(duì)c-kit與SMA以及c-kit與神經(jīng)纖維進(jìn)行免疫熒光雙重標(biāo)記，研究豚鼠壺腹部Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和分布特征。(2)豚鼠

5、壺腹部切片HE染色觀察壺腹部形態(tài)。(3)制備豚鼠壺腹部標(biāo)本超薄切片，透射電鏡觀察ICLCs超微結(jié)構(gòu)及其與SMA和神經(jīng)纖維之間的細(xì)胞連接結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：
　　(1)豚鼠壺腹部的ICLCs呈紡錘形，有向外伸展的突起，有電子致密度高的巨大卵圓形核，核周胞質(zhì)少，胞質(zhì)內(nèi)有豐富的線粒體，大量的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，沿ICLCs胞膜有空泡。(2)壺腹部ICLCs主要分布于粘膜下環(huán)肌層表面、環(huán)肌層與縱肌層之間、肌間神經(jīng)叢區(qū)及環(huán)肌層與縱肌

6、層內(nèi)。ICLCs在肌間神經(jīng)叢區(qū)相互連接形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，ICLCs突起也和平滑肌細(xì)胞形成緊密關(guān)系。(3) ICLCs與神經(jīng)纖維之間形成緊密連接，在壺腹部環(huán)形肌層縱肌層間圍繞有神經(jīng)纖維，神經(jīng)纖維有高電子致密度的軸芯和電子致密度低的囊泡，神經(jīng)元軸突末端與環(huán)肌層、縱肌層形成突觸樣連接，提示在解剖及功能上密切相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　豚鼠壺腹部存在ICLCs，豚鼠壺腹部ICLCs主要分布于平滑肌層或肌束以及肌間神經(jīng)叢區(qū)。壺腹部ICLCs