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文檔簡介
1、目的:通過膜片鉗(PatchClamp)技術(shù),檢測(cè)位于高糖環(huán)境下體外培養(yǎng)的豚鼠膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞的Ih電流,探討高糖環(huán)境對(duì)豚鼠膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞電生理功能的影響,豐富對(duì)糖尿病膀胱病變(DCP)發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí),為DCP的臨床治療提供理論依據(jù)。
方法:本實(shí)驗(yàn)通過膠原酶消化法分離、提取、純化豚鼠膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞并培養(yǎng)20小時(shí)后,分別更換為含葡萄糖濃度5mmol/L、15mmol/L、30mmol/L培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
2、72小時(shí)(其中5mmol/L為正常對(duì)照組和Ih電流鑒定組,15mmol/L、30mmol/L為高糖組),然后應(yīng)用膜片鉗技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),記錄ICCs樣細(xì)胞的Ih電流值。
結(jié)果:采用膜片鉗技術(shù)檢測(cè)各組Ih電流值后,顯示正常對(duì)照組(5mmol/L組)與高糖組(15mmol/L組、30mmol/L組)ICCs樣細(xì)胞的Ih電流值存在明顯差異(P<0.01),且表現(xiàn)為隨著葡萄糖濃度的增加Ih電流的均值隨之減??;正常對(duì)照組與Ih電流鑒定組電流
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