高糖環(huán)境對(duì)豚鼠膀胱Cajal樣細(xì)胞形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)觀察高糖環(huán)境下豚鼠膀胱 Cajal 樣間質(zhì)細(xì)胞 (interstitial cells of Cajal，ICCs) 形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)的變化，探討高糖環(huán)境對(duì)豚鼠膀胱Cajal 樣間質(zhì)細(xì)胞的影響。
　　 方法：酶消化法原代培養(yǎng)豚鼠膀胱Cajal 樣間質(zhì)細(xì)胞，采用透射電鏡觀察在不同葡萄糖濃度（5、10、15mmol/L）不同時(shí)間段 （24、72h） 體外培養(yǎng)的ICCs 樣細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)；采用激光共聚焦顯微鏡成像技術(shù)測(cè)量 Fl

2、uo-4AM 負(fù)載后的Cajal 樣間質(zhì)細(xì)胞長(zhǎng)度并記錄其胞內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度的變化。
　　 結(jié)果：透射電鏡觀察到隨糖濃度增高和培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，ICCs樣細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器明顯減少，線粒體大小不等，數(shù)量減少，腫脹、空泡樣改變甚至溶解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、空泡樣變，胞質(zhì)廣泛溶解，突起消失；電鏡下還觀察到部分膀胱Cajal 樣細(xì)胞間具有細(xì)胞間橋樣結(jié)構(gòu)；高濃度長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)下的Cajal 樣細(xì)胞染色后出現(xiàn)染色深淺不同的兩類細(xì)胞，染色淺的細(xì)胞中出現(xiàn)微絲素成份，

3、而染色深的細(xì)胞則出現(xiàn)了細(xì)胞液化壞死。運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡成像技術(shù)連續(xù)掃描和測(cè)量 Cajal 樣細(xì)胞長(zhǎng)度，見(jiàn)體外原代培養(yǎng)的膀胱 Cajal 樣間質(zhì)細(xì)胞隨糖濃度增高，ICCs樣細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光值：5mmol/L/24h組和5mmol/L/72h組并無(wú)明顯差別；與 5mmol/L/24h 組相比，10mmol/L/24h組是升高的，而 15mmol/L/24h 組則降低；10mmol/L72h 組和 15mmol/L/72h 組都是升高的，但

4、 15mmol/L/72h 組較 10mmol/L/72h 組低，開(kāi)始出現(xiàn)下降趨勢(shì)。ICCs 樣細(xì)胞長(zhǎng)度：5mmol/L/24h 組和 5mmol/L/72h 組并無(wú)明顯差別；24h 組隨糖濃度增高，10mmol/L 組和15mmol/L 組 ICCs 樣細(xì)胞長(zhǎng)度逐漸縮短；72h 組隨糖濃度增高 10mmol/L/72h 組細(xì)胞長(zhǎng)度增長(zhǎng)，而15mmol/L/72h 組細(xì)胞縮短。
　　 結(jié)論：高糖環(huán)境可對(duì)豚鼠膀胱Cajal 樣間質(zhì)