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文檔簡介
1、實驗目的: 應用巢式PCR方法檢測人類多瘤病毒KIPyV和WUPyV基因,并對擴增產(chǎn)物進行序列分析;用RT-PCR方法檢測RSV、IFV(A、B型)、PIV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)、hRV、ADV、冠狀病毒OC43、229E及hMPV、HBoV、冠狀病毒NL63、HKUl,并進行序列測定,以了解蘭州地區(qū)急性呼吸道感染患兒病毒感染狀況。 對象及方法: 1.收集蘭州地區(qū)2006年12月到2007年11月確診為急性呼吸道感染患
2、兒的鼻咽抽吸物(Nasopharyngea aspirates,NPA)標本。 2.用巢式PCR方法檢測人類多瘤病毒KIPyV和WUPyV基因,并對擴增產(chǎn)物進行序列分析:用RT-PCR方法及PCR檢測RSV、IFV(A、B型)、PIV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)、hRV、ADV、冠狀病毒OC43、229E、NL63、HKUl及hMPV、HBoV。 3.對各種病毒在兒童急性呼吸道感染的臨床特點進行分析。 結果: 1.4
3、06例鼻咽抽吸物(NPA)標本檢測到11例KIPyV和17例WUPyV陽性擴增產(chǎn)物,陽性檢出率分別是2.7%和4.2%。將陽性PCR產(chǎn)物進行序列測定及分析發(fā)現(xiàn)與Genebank中已知序列同源性在96%~100%之間,KIPyV和WUPyV蘭州株的核苷酸變異較小,但也有個別堿基的插入和突變; 2.KIPyV和/或WUPyV感染病例主要是3歲以下兒童。17例WUPyV感染患兒中男性6例,女性11例,男女感染率之比1:1.8。11例K
4、IPyV感染患兒中男性7例,女性4例,男女感染率之比1.75:1。兩種病毒的檢出率在性別上均無差別(X2=0.946,P>0.05:X2=0.781,P>0.05): 3.KI多瘤病毒感染兒童年齡最大9歲,最小3天,中位數(shù)年齡7月。3歲以內(nèi)患兒占KIPyV感染患兒的73%(8/11)。WUPyV感染兒童年齡最大8歲,最小1天,中位數(shù)年齡2歲2月,3歲以內(nèi)患兒占WUPyV感染患兒的65%(11/17); 4.KIPyV和W
5、UPyV陽性病例主要分布在秋冬季,KIPyV 11月和1月檢出數(shù)最多,均為3例,WUPyV11月檢出數(shù)達到高峰,為9例; 5.KIPyV和WUPyV感染陽性共28例,混合感染其他病毒總共20例,其中KIPyV混合其他病毒感染8例,WUPyV混合感染11例,混合感染率分別是72.7%(8/11)和64.7%(11/17); 6.臨床診斷上呼吸道感染、細支氣管炎、和支氣管肺炎中均KIPyV和WUPyV感染; 7.40
6、6例患兒總共檢出病毒感染陽性病例232例,總檢出率達57.1%。其中RSV感染陽性118份,陽性率為29.1%;hRV感染陽性56份;陽性率為13.8%;ADV感染陽性52份;陽性率為12.8%;PIV3感染陽性38份;陽性率為9.4%;HBOV感染陽性29份;陽性率為7.1%;hMPV感染陽性29份;陽性率為7.1%:IFVA感染陽性29份;陽性率為7.1%;Hcov-HKUl感染陽性12份;陽性率為3.0%; IFVB感染陽性6份;
7、陽性率為1.5%;PIV1感染陽性2份;陽性率為0.5%:Hcov-229E感染陽性1份;陽性率為0.2%;未能檢測到PIV2及Hcov-OC43: 8.242例男性患者中病毒感染141例(58.3%),女性164例感染91例(55.5%),男女感染率的之比為1.05:1,沒有明顯差異(X2=0.579,P>0.05); 9.患兒年齡最大14歲,最小1天。平均年齡2歲5月。1歲以內(nèi)患兒病毒感染89例,占病毒感染人數(shù)的38
8、.4%,1~3歲患兒病毒感染78例,占總感染人數(shù)的33.6%,3~5歲患兒病毒感染39例,占16.8%,大于5歲患兒病毒感染陽性26例,占11.2%;隨著年齡的增長,病毒的陽性檢出率逐漸下降。各年齡組的發(fā)病率之間無明顯統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 10.本地區(qū)兒童病毒性急性呼吸道感染的季節(jié)分布較明顯,以冬春季節(jié)為主。 結論: 1.病毒病原在蘭州地區(qū)兒奄呼吸道感染中占有重要地位,57.1%的患兒病毒感染陽性。
9、 2.蘭州地區(qū)急性呼吸道感染患兒中檢測到KI和WU多瘤病毒基因。多瘤病毒KI和WU的陽性檢出率分別是2.7%和4.2%。感染病例主要是3歲以下兒童,性別無明顯差異。 3.本地區(qū)兒章病毒性呼吸道感染以5歲以下患兒為主,2歲以下年齡組更為多見,且具有明顯的季節(jié)分布特征,以冬春季節(jié)最多。 4.本地區(qū)小兒病毒性呼吸道感染病原中RSV、hRV、ADV及PIV3占有主要地位,近年新發(fā)現(xiàn)病毒Hmpv、HBoV亦占有一定比例。新型冠狀病毒NL
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