吲哚胺2，3雙加氧酶對(duì)肝癌細(xì)胞的作用.pdf

1、目的： 吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)在很多腫瘤微環(huán)境中，為腫瘤逃避免疫監(jiān)督起到了重要的作用，但起作用的具體機(jī)制尚在研究之中。本文用IDO以及色氨酸經(jīng)IDO催化后分解生成的代謝產(chǎn)物(L-犬尿素、鄰氨基苯甲酸、喹啉酸)作用于肝癌細(xì)胞，觀察肝癌細(xì)胞的生長及凋亡的情況。 方法： 在HepG2細(xì)胞培養(yǎng)中加入IDO，用MTT法測定HepG2細(xì)胞的活力，另用IDO的抑制劑1-甲基色氨酸(1-MT)進(jìn)行干預(yù)，觀察IDO對(duì)Hep

2、G2細(xì)胞活力的影響作用能否被抑制。觀察色氨酸各個(gè)代謝產(chǎn)物對(duì)肝癌細(xì)胞生長的影響，用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡率以及細(xì)胞壞死率的變化。 結(jié)果: 不同濃度的IDO作用于HepG2細(xì)胞具有明顯的時(shí)間和劑量依賴性，IDO濃度在0.5mmol/L和5mmol/L時(shí)可以促進(jìn)。HepG2細(xì)胞的生長(P<0.05)，最佳作用時(shí)間24小時(shí)，光密度值分別為1.28±0.04、1.31±0.02，顯著高于對(duì)照組0.73±0.03；加入1-

3、MT后IDO的這一作用受到抑制。代謝產(chǎn)物中鄰氨基苯甲酸與L-犬尿素對(duì)HepG2細(xì)胞有促進(jìn)生長的作用，并具有明顯的時(shí)間劑量依賴性；與對(duì)照組相比，兩物質(zhì)在0.1mmol/L濃度水平上作用24h的生長抑制率分別為(-32.94±1.05)％和(-65.15±0.46)％，1mmol/L時(shí)作用24h的生長抑制率分別為(-50.58±1.12)％和(-78.62±0.92)％。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測，兩種物質(zhì)均可以改變HepG2細(xì)胞周期分布(減少G0-

4、G1期細(xì)胞百分比，增加S期比例)。只有喹啉酸在1mmol/L時(shí)能發(fā)揮提高細(xì)胞壞死率和凋亡率，抑制肝癌細(xì)胞生長的作用(P<0.05)，其最佳作用時(shí)間為24h，此時(shí)的細(xì)胞壞死率為(23.43±2.16)％，凋亡率為(9.01±0.24)％。 結(jié)論: IDO表現(xiàn)為促進(jìn)肝癌細(xì)胞生長的作用，1-MT可以抑制這一作用。L-犬尿素、鄰氨基苯甲酸能夠通過改變HepG2細(xì)胞周期的分布增加S期細(xì)胞的比例，促進(jìn)HepG2細(xì)胞的增殖。喹啉酸在較