兩種檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)凝血三項(xiàng)測(cè)定的對(duì)比.pdf

1、背景：
　　 隨著臨床上出血性疾病和血栓性疾病患者的增多，凝血酶原時(shí)間（PT）-國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）、部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、纖維蛋白原定量（FIB）測(cè)定，簡(jiǎn)稱凝血三項(xiàng)，是診斷出、凝血性疾病的基本檢測(cè)項(xiàng)目，是凝血系統(tǒng)檢查的必做項(xiàng)目，需要實(shí)驗(yàn)室提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。PT、APTT測(cè)定是外源性及內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的過篩試驗(yàn)，特別對(duì)血液病、DIC、腦出血、肝病、急慢性感染、腦梗死、心肌梗死等病例的試驗(yàn)很有臨床意義；又是外科手術(shù)全篩查的

2、主要項(xiàng)目檢查之一；另外還是口服抗凝藥物治療監(jiān)測(cè)的首選指標(biāo)。
　　 由于檢驗(yàn)設(shè)備日異更新，血凝分析儀已普及各大、中、小型醫(yī)院，一個(gè)實(shí)驗(yàn)室有兩臺(tái)或以上的大小型血凝儀，這就要求檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性能夠達(dá)到統(tǒng)一。但凝血系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢查是種多因素分析，各項(xiàng)指標(biāo)與凝血因子濃度間沒有線性關(guān)系，不同的方法、試劑及檢測(cè)儀器都可能導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果的差異。因此，對(duì)其室內(nèi)、室間檢測(cè)結(jié)果的可比性帶來不少困難。
　　 目的：
　　 現(xiàn)有兩臺(tái)

3、血凝儀，一臺(tái)是STAGO公司生產(chǎn)的START-4通道半自動(dòng)血凝儀，檢測(cè)方法為凝固（磁珠）法；另一臺(tái)是SYSMEX公司生產(chǎn)的CA7000全自動(dòng)血凝儀，采用光學(xué)（散射光比濁法）檢測(cè)。將這兩臺(tái)不同檢測(cè)系統(tǒng)（不同的型號(hào)、不同的檢測(cè)原理，不同的試劑）的儀器進(jìn)行比對(duì)、評(píng)估，以了解兩檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定PT、INR、APTT、FIB測(cè)定是否有差異怎樣有利于臨床判讀。兩種儀器結(jié)果的評(píng)估對(duì)今后醫(yī)院開展凝血常規(guī)檢測(cè)工作具有非常重要的意義，也能為使用同類儀器的其他實(shí)

4、驗(yàn)室提供參考數(shù)據(jù)。
　　 經(jīng)過比對(duì)，有效提高了科內(nèi)不同凝血分析儀器間的可比性，能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)偶然誤差和儀器的系統(tǒng)誤差，促進(jìn)工作人員及時(shí)解決存在的各種問題。盡可能減少由于在不同型號(hào)儀器上所測(cè)定結(jié)果差異較大而誘發(fā)的不必要的醫(yī)療糾紛，有效地保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度，提高檢驗(yàn)的質(zhì)量。
　　 方法：
　　 1.儀器精密度檢測(cè)。參考美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）文件，先作一個(gè)初步的批內(nèi)精密度測(cè)定，選取一份40

5、例正常人混合血漿各自在兩臺(tái)儀器上連續(xù)檢測(cè)20次，計(jì)算PT、APTT和FIB的SD與CV評(píng)價(jià)批內(nèi)精密度。再把一份正常人混合血漿分裝20管，連續(xù)20天每天檢測(cè)兩次，計(jì)算PT、APTT和FIB的SD與CV評(píng)價(jià)批間精密度。從而反映兩儀器的重復(fù)性如何。
　　 2.儀器準(zhǔn)確度檢測(cè)。用DADE中值的、高值的質(zhì)控品在CA7000儀器上各連續(xù)測(cè)定20次，計(jì)算出均值，標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)及偏差系數(shù)。同樣，STAGO配套的中值和高值質(zhì)控品在START-4

6、儀器上各連續(xù)測(cè)定20次。驗(yàn)證兩種檢測(cè)系統(tǒng)的準(zhǔn)確度。
　　 3.比對(duì)試驗(yàn)。每天選取臨床不同范圍（正常值和異常值）的凝血常規(guī)標(biāo)本，同時(shí)在兩臺(tái)儀器上進(jìn)行檢測(cè)，共記錄20份中值的PT、APTT和FIB的結(jié)果和20份高值的結(jié)果。以CA-7000作為參比儀器，其在比對(duì)過程中所測(cè)的值為靶值，START-4為測(cè)試儀器其所測(cè)的值作為測(cè)定值，作方法學(xué)相關(guān)性比較，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r值和斜率a值。利用配對(duì)t檢驗(yàn)，計(jì)算每組的t值和P值。
　　 4.抗

7、干擾試驗(yàn).根據(jù)NCCIS文件的要求，采取在體外添加干擾物于正常血漿中的方法制備待測(cè)標(biāo)本。應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)。收集新鮮混合血漿，一份標(biāo)本一分為二，一份加入疑似干擾物作為測(cè)定標(biāo)本（T），另一份加同樣體積的蒸餾水作為對(duì)照標(biāo)本（C），同時(shí)在兩臺(tái)儀器上進(jìn)行檢測(cè)。干擾值在對(duì)照組±1.96 SD（95％可信限）范圍內(nèi)為無顯著干擾，超出范圍的表示此濃度開始對(duì)臨床標(biāo)本的檢測(cè)有干擾。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過批內(nèi)精密度測(cè)定，兩種檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定

8、PT（INR）、APTT結(jié)果的CV值均<5％，F(xiàn)IB的CV<6.6％，變異系數(shù)均在允許的范圍內(nèi)，重復(fù)性好。CA7000測(cè)定PT、INR、APTT、FIB的批內(nèi)CV分別為2.2％，1.9％，2.9％，4.4％；START-4測(cè)定的批內(nèi)CV分別為3.1％，4.1％，3.5％，6.3％。CA7000測(cè)定PT、INR、APTT、FIB的批問CV分別為3.8％，2.5％，4.3％，5.9％；START-4測(cè)定的批間CV分別為4.0％，3.4％，4

9、.6％，6.8％。全自動(dòng)血凝儀CA7000比半自動(dòng)血凝儀START-4測(cè)定的CV小。批內(nèi)的比批間的CV值小。
　　 2.用CA7000儀器及配套試劑檢測(cè)DAEA中值和高值質(zhì)控品的準(zhǔn)確度，CV值<5％和6.6％，偏差系數(shù)均<5％，符合率達(dá)95％。START-4儀器及配套試劑檢測(cè)STAGO中值和高值質(zhì)控品的準(zhǔn)確度，除FIB以外的測(cè)定值的CV值均<5％，偏差系數(shù)也<5％。
　　 3.通過CA7000與START-4系統(tǒng)正常值范

10、圍和異常值的病人標(biāo)本測(cè)定結(jié)果的比對(duì)，兩種檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)定值p<0.05在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異。以CA7000系統(tǒng)為參考方法與START-4系統(tǒng)進(jìn)行方法學(xué)相關(guān)性比較，發(fā)現(xiàn)這兩種方法學(xué)比較的r值>0.9，說明相關(guān)性好。
　　 4.對(duì)兩種儀器進(jìn)行干擾試驗(yàn)，結(jié)果是START-4抗干擾能力強(qiáng)，對(duì)高血脂、溶血和高膽紅素的標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果均在±1.96SD的范圍內(nèi)，表示無干擾。CA7000抗干擾能力一般，其測(cè)定結(jié)果表明當(dāng)溶血標(biāo)本游離血紅蛋白濃

11、度達(dá)到20g/L時(shí)，CA7000測(cè)定的PT、APTT明顯延長(zhǎng)，F(xiàn)IB減低，三個(gè)項(xiàng)目的干擾值都超出了±1.96SD的范圍，說明此三項(xiàng)檢測(cè)同時(shí)受干擾。在CA7000上測(cè)定時(shí)，當(dāng)甘油三酯濃度為21.6mmol/L、36mmol/L、43.2mmol/L時(shí)，F(xiàn)IB、PT、APTT測(cè)定結(jié)果依次開始受干擾，檢測(cè)結(jié)果大于120秒，干擾值也超出±1.96SD的范圍。FIB測(cè)定抗干擾能力最差，APTT最好。當(dāng)總膽紅素在353μmol/L以內(nèi)，儀器都不受干

12、擾，表明儀器抗膽紅素干擾能力強(qiáng)。
　　 結(jié)論：
　　 目前，血凝儀隨血栓和止血試驗(yàn)檢測(cè)的大力推廣，性能日趨穩(wěn)定。START-4通道半自動(dòng)血凝儀和CA7000全自動(dòng)血凝儀檢測(cè)系統(tǒng)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性都好，測(cè)定的精密度、準(zhǔn)確度都達(dá)到了臨床的要求。全自動(dòng)血凝儀的精密度比半自動(dòng)血凝儀的要更好。在操作時(shí)，半自動(dòng)儀器較為繁瑣，容易受操作者熟練程度的影響，可能有檢測(cè)不出結(jié)果或明顯的錯(cuò)誤結(jié)果，需要再重新測(cè)定，受人為因素影響，而全自動(dòng)血凝儀基

13、本排除了人為因素的影響，而且可同時(shí)檢測(cè)幾個(gè)項(xiàng)目，速度快。
　　 通過比對(duì)實(shí)驗(yàn)，可以清楚地看到，不同的系統(tǒng)間存在一定的差異，對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析說明兩個(gè)系統(tǒng)對(duì)PT（INR）、FIB、APTT的檢測(cè)結(jié)果有顯著性差異。可能與兩公司生產(chǎn)配套試劑不同，靈敏度有一定的差異有關(guān)。方法學(xué)不同，檢測(cè)結(jié)果也會(huì)有差異。
　　 我們認(rèn)為對(duì)于凝血常規(guī)同一項(xiàng)目不同檢測(cè)系統(tǒng)的對(duì)測(cè)定結(jié)果有很大的影響，同一實(shí)驗(yàn)室最好用同一檢測(cè)系統(tǒng)。如實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有不同

14、的檢測(cè)系統(tǒng)存在，應(yīng)定期用正常人混合血漿作比對(duì)試驗(yàn)，并每天和病人標(biāo)本一樣做室內(nèi)質(zhì)控。由于兩個(gè)系統(tǒng)對(duì)PT（INR）、FIB、APTT的檢測(cè)結(jié)果有顯著性差異，我們要給不同的檢測(cè)系統(tǒng)建立不同的參考范圍，在自己的參考范圍內(nèi)進(jìn)行臨床判讀。
　　 針對(duì)本科室的兩臺(tái)血凝儀，Sysmex CA7000是全自動(dòng)的血凝儀，操作方便，重復(fù)性好，速度快，日常工作可以以此為主；但對(duì)脂血、溶血、黃疸的抗干擾性不如STAGO-START-4通道半自動(dòng)血凝儀，遇