甲乙肝聯(lián)合疫苗中甲肝乙肝抗原相互作用機(jī)制的探索研究.pdf

1、甲型肝炎(甲肝)和乙型肝炎(乙肝)是最常見(jiàn)的病毒性肝炎，它們是嚴(yán)重危害公眾健康的傳染病。其中乙肝病毒(hepatitisBviral)感染可以發(fā)展成慢性肝病、肝硬化或肝細(xì)胞癌。甲肝病毒(hepatitisAviral)感染一般不會(huì)引起慢性肝病，少數(shù)成人患者病情遷延或復(fù)發(fā)，個(gè)別患者病程可達(dá)六個(gè)月以上，預(yù)后較差。盡管甲肝和乙肝的主要傳播途徑不同，但近年來(lái)有大量報(bào)道，肝炎患者有相當(dāng)一部分人同時(shí)感染甲肝和乙肝。因此，預(yù)防甲肝和乙肝對(duì)控制病毒性肝

2、炎的感染和流行尤為重要。正因?yàn)榧赘魏鸵腋螌?duì)人類健康危害很大，而且目前尚無(wú)特效藥物治療，所以甲肝、乙肝疫苗的廣泛應(yīng)用可對(duì)甲肝乙肝病毒的流行起到非常重要的遏制作用。近年來(lái)，研制和使用含有兩種或多種抗原，可以預(yù)防兩種或多種疾病的聯(lián)合疫苗受到世界各國(guó)的重視，已成為疫苗開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)。聯(lián)合疫苗為兒童免疫規(guī)劃的連續(xù)、簡(jiǎn)化和擴(kuò)大所必需。甲乙型肝炎聯(lián)合疫苗(CombinedHepatitiesAandBvaccine)是具有甲、乙型肝炎雙重特異性保護(hù)性能，

3、同時(shí)預(yù)防這兩種疾病的一種聯(lián)合疫苗。目前，在甲乙肝聯(lián)合疫苗的研究中表明，甲乙型肝炎聯(lián)合疫苗誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的抗體水平高于單價(jià)疫苗。研究者們普遍認(rèn)為采用聯(lián)合疫苗接種比單價(jià)苗接種能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生更好的乙肝反應(yīng)，推測(cè)兩種抗原可能相互作用互為佐劑，但尚無(wú)系統(tǒng)的免疫學(xué)研究的報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)不同配比的實(shí)驗(yàn)性甲乙肝聯(lián)合疫苗和單價(jià)苗免疫小鼠后的四個(gè)指標(biāo)的檢測(cè)：流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞因子水平和T細(xì)胞亞群分型，MTT法測(cè)脾細(xì)胞增殖水平，ELISA法檢測(cè)抗體

4、水平，來(lái)評(píng)估聯(lián)合疫苗的細(xì)胞及體液免疫情況，以此衡量免疫應(yīng)答的性質(zhì)，評(píng)估免疫記憶效果，最終獲得兩種疫苗的最佳配比，并以此進(jìn)一步分析甲乙聯(lián)合疫苗中兩種抗原的相互作用機(jī)制，同時(shí)也期望更全面的了解甲乙肝聯(lián)合疫苗的免疫原性。 我們采用醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所生產(chǎn)的甲肝滅活疫苗和深圳康泰生物制品公司生產(chǎn)的基因工程重組乙肝酵母疫苗半成品，以640Eu/ml甲肝抗原與10ug和20ug的乙肝表面抗原進(jìn)行配比混合。不同配比的聯(lián)合疫苗與單價(jià)疫苗分別于BAL

5、B/C小鼠腓腸肌接種各200μl/只。每組5只小鼠，于接種后第4周，再經(jīng)腓腸肌注射相同的疫苗，加強(qiáng)免疫1次，200μl/只。初次免疫后1、2、3、4周和加強(qiáng)免疫后2周，分別檢測(cè)體液和細(xì)胞免疫情況。 結(jié)果表明：甲乙肝聯(lián)合疫苗均顯示出能刺激小鼠產(chǎn)生較單價(jià)苗更強(qiáng)的免疫應(yīng)答。在初次免疫的早期，加入甲肝抗原在一定程度上增強(qiáng)了乙肝疫苗的細(xì)胞免疫原性，起到了佐劑的作用。綜合分析本試驗(yàn)的結(jié)果，我們得出的結(jié)論是我所自主研制的甲乙肝聯(lián)合疫苗640E