bFGF對子癇前期患者內(nèi)皮細胞ICAM-1表達影響的實驗研究.pdf

1、目的: 本實驗通過研究子癇前期患者血清誘導(dǎo)培養(yǎng)的人類臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVC)細胞間粘附分子-1(ICAM-1)的表達及外源性堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)對其的影響，探討bFGF對內(nèi)皮細胞損傷的保護作用，以期為妊娠期高血壓疾病的治療提供新的途徑。 材料與方法: 一、研究對象 隨機選擇在2006年1月-2006年8月于我院分娩的重度子癇前期單胎妊娠患者(按照樂杰主編《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版子癇前期診斷標(biāo)準選

2、擇病例)共15例，隨機選擇同期無妊娠合并癥及并發(fā)癥的單胎正常妊娠孕婦15例作對照組。兩組孕婦的年齡及孕周差異無顯著性。所有研究對象均于入院后未經(jīng)任何治療，抽取空腹時肘前靜脈血10ml，并3000r/min離心15min后取上清，-80℃冰箱保存待用。 二、實驗分組 正常妊娠培養(yǎng)基(對照組)子癇前期血清條件培養(yǎng)基(PE組)含bPGF10ng/ml的子癇前期血清條件培養(yǎng)基(PE+b組)20％DMEM(含20％的小牛血清，蛋白

3、濃度5mg/ml，余同無血清的DMEM，pH7.2)做為陰性對照。 三、方法 按常規(guī)方法培養(yǎng)血管內(nèi)皮細胞株ECV-304，待細胞融合生長后，分別加入正常妊娠患者的血清(對照組)、子癇前期患者血清(PE組)、含bFGF10ng/ml及子癇前期患者血清的培養(yǎng)基(PE+b組)，培養(yǎng)24小時(各15例，并設(shè)陰性對照組)，分別應(yīng)用細胞酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、免疫細胞化學(xué)的方法比較各組表達的ICAM-1的水平。 結(jié)果

4、: 一、各組ECV-304表達ICAM-1細胞酶聯(lián)免疫吸附試驗結(jié)果 PE組(OD值為0.2751±0.01831)較對照組(OD值為0.1845±0.00761)ICAM-1的表達明顯增強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。PE+b組(OD值為0.1879±0.01058)較PE組ICAM-1的表達明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。PE+b組較對照組ICAM-1的表達無明顯差異。 二、ECV-304表達IcAM-1免疫細胞化學(xué)染色結(jié)果

5、 定量結(jié)果顯示，PE組ICAM-1的陽性細胞表達率(26.59±3.577)明顯高于對照組(12.23±3.041)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與PE組比較，PE+b組ICAM-1的陽性細胞表達率(13.75±2.913)明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。PE+b組較對照組ICAM-1的表達無明顯差異。 總之，ECV-304表達ICAM-1的水平，PE組較對照組明顯增強；PE+b組較PE組明顯下降；PE+b組較對照組無明顯差異。