腺相關(guān)病毒介導(dǎo)血管抑素對人臍靜脈內(nèi)皮細胞VEGF和ICAM-1表達的影響.pdf

1、目的：探討重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的血管抑素基因(recombinant adeno-associated virus carrying angiostatin gene, rAAV-AS)對人臍靜詠內(nèi)皮細胞(Human umbilicalvein endothelial cells， HUVECs)血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和細胞間黏附分子-1(Intercellul

2、ar adhesion molecule-1， ICAM-1)表達的影響，以探討rAAV-AS對糖尿病大血管病變的保護作用。
　　 方法：選擇體外培養(yǎng)HUVECs，細胞傳至第5代，隨機分為6組：正常組(NG組)、高糖組(HG組)、rAAV-05×106v.g./cell組(rAAV-0組)，rAAV-AS5×104v.g./cell組(AS1組)、rAAV-AS5×105v.g./cell組(AS2組)、rAAV-AS5×106

3、v.g./cell組(AS3組)。rAAV-AS干預(yù)HUVECs24、48、72h，免疫印跡法檢測HUVECs中血管抑素的表達，光鏡下觀察HUVECs的形態(tài)變化，免疫細胞化學(xué)法及ELISA法檢測HUVECs中VEGF、ICAM-1表達情況。
　　 結(jié)果：(1)免疫印跡法結(jié)果：與NG組比較，HG組和rAAV-0組中AS表達減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與HG組相比，rAAV-0組中VEGF的蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞

4、0.05)；與HG組相比，AS各組AS表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)；(2)免疫細胞化學(xué)及ELISA結(jié)果：與NG組相比，HG組和rAAV-0組VEGF和ICAM-1的蛋白表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與HG組相比，rAAV-0組中VEGF的蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與HG組相比，AS各組VEGF和ICAM-1的蛋白含量逐漸降低，并呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。