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文檔簡介
1、前言: 妊娠期高血壓疾病是導致孕產(chǎn)婦和圍生兒病率和死亡率的主要原因之一。多年來,妊娠期高血壓疾病病因和發(fā)病機制尚未能解決,因此還沒有找到一個能從根本上治愈的方法。但近期研究表明血管內(nèi)皮損傷或功能紊亂是妊娠期高血壓疾病發(fā)病的中心環(huán)節(jié),因此,能夠保護血管內(nèi)皮免受損傷或修復受損血管內(nèi)皮的藥物對治療妊娠期高血壓疾病是有效的。 堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)是一種體內(nèi)廣泛分布的多效能的細胞生長因子,是迄今發(fā)現(xiàn)的促內(nèi)皮細胞增殖作
2、用最強的生長因子。bFGF還是潛在性的血管內(nèi)皮細胞絲裂原,可明顯的加快并促進損傷后血管內(nèi)皮細胞的修復。近年來,有關bFGF的細胞保護作用倍受矚目。 關于子癇前期的發(fā)病與bFGF的關系目前報道罕見,在非針對于癇前期的一些體外試驗表明,用外源性bFGF干預體外培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細胞,可發(fā)現(xiàn)其呈現(xiàn)保護性治療效果。這種作用與其能明顯下調(diào)靜止或被細胞因子刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)的血管內(nèi)皮細胞粘附分子(VCAM-1)的表達有關。提示
3、bFGF在內(nèi)皮細胞激活及損傷等方面起到一個調(diào)節(jié)者的作用。因此設想用外源性bFGF干預受子癇前期患者血清影響的血管內(nèi)皮細胞,觀察其能否影響血管內(nèi)皮細胞的細胞粘附分子(CAMs)的表達,以期為子癇前期的治療提供一個新的途徑。 目的: 本試驗通過觀察外源性堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)干預子癇前期患者血清刺激的ECV-304細胞(人類血管內(nèi)皮細胞株)血管內(nèi)皮細胞粘附分子(VCAM-1)的表達情況,探測其對內(nèi)皮細胞有無保護性
4、作用,為治療妊娠期高血壓疾病提供一個新的途徑。 方法: 用10%DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)ECV-304細胞,待細胞融合成單層時更換下列培養(yǎng)基: (1)正常妊娠血清條件培養(yǎng)基(15例); (2)子癇前期血清條件培養(yǎng)基(20例); (3)含5、10、50ng/ml堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)子癇前期血清條件培養(yǎng)基(20例); (4)20%DMEM陰性對照(含20%胎牛血清,蛋白濃度5mg/ml
5、,余同無血清DMEM培養(yǎng)基,PH7.2),培養(yǎng)24小時后分別用免疫組化法和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測細胞中表達血管內(nèi)皮細胞粘附分子(VCAM-1)的情況。 結(jié)果: (1)子癇前期血清條件培養(yǎng)基組較正常妊娠血清條件培養(yǎng)基組細胞表達血管內(nèi)皮細胞粘附分子(VCAM-1)量明顯增多。 (2)含堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)子癇前期血清條件培養(yǎng)基組較子癇前期血清條件培養(yǎng)基組細胞表達血管內(nèi)皮細胞粘附分子(V
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