配伍紅花籽油增強腦細胞及其線粒體對自由氧基介導(dǎo)的細胞損傷的抵抗機制研究.pdf

1、目的：①制備由α-亞麻酸和亞油酸按不同比例混合而成的標準配伍紅花籽油；②建立H2O2誘導(dǎo)的腦細胞(PC12細胞株)損傷(凋亡)模型及研究配伍紅花籽油增強腦細胞抵抗自由氧基介導(dǎo)的細胞損傷的機制；③利用H2O2/Fe2+誘導(dǎo)的線粒體損傷體系研究配伍紅花籽油抑制脂質(zhì)過氧化的能力。 方法：①制備配伍紅花籽油并利用GC(氣相色譜法)法測定α-亞麻酸和亞油酸含量；②建立H2O2誘導(dǎo)的PC12細胞凋亡模型，利用MTT法、流式細胞技術(shù)及熒光成像

2、技術(shù)等方法對不同濃度的配伍紅花籽油(0.5％DMSO溶液)藥物干預(yù)進行分析，確定PC12細胞的活力和量效關(guān)系；③用改良的Clark技術(shù)提取大鼠腦線粒體，建立H2O2/Fe2+氧化損傷體系，檢測配伍紅花籽油藥物干預(yù)前后的線粒體褐脂質(zhì)、膜的流動性、ATPase活性、膨脹度等指標變化。 結(jié)果：①利用本實驗方法提取的混合十八碳二、三烯酸中α-亞麻酸(ALA)、亞油酸(LA)的含量分別達62.49％和22.91％，滿足配伍紅花籽油的要求；

3、②H2O2誘導(dǎo)細胞損傷(凋亡)的最低濃度為200μM，配伍紅花籽油對腦細胞(PC12細胞)抵抗自由氧基損傷產(chǎn)生作用的最低濃度為0.3mg/ml；③配伍紅花籽油濃度在0.3-0.5mg/ml時，可以明顯提高線粒體抑制脂質(zhì)過氧化的能力，從而改善線粒體膜流動性、膨脹度和ATP酶(ATPase)活性。 結(jié)論：①提取與制備配伍紅花籽油的方法具有可重復(fù)性和可行性；②H2O2誘導(dǎo)的細胞損傷模型可以用于配伍紅花籽油的細胞藥物干預(yù)試驗，而且具有可