奶牛乳腺上皮細胞在炎性狀態(tài)下對基質(zhì)成纖維細胞生物學(xué)特性及功能的影響.pdf

1、奶牛乳腺炎是由于乳房損傷或病原微生物入侵所引起的機體代謝和生理狀態(tài)改變的炎癥反應(yīng)，是嚴重影響奶牛業(yè)發(fā)展的最常見的疾病之一。在奶牛乳腺發(fā)生炎癥的早期，乳腺導(dǎo)管中的病原菌會首先侵入腺泡表層的乳腺上皮細胞，進而影響乳腺上皮細胞的生理特性，導(dǎo)致上皮細胞的炎性細胞因子異常分泌。乳腺上皮細胞異常分泌的炎性細胞因子通過內(nèi)環(huán)境影響周圍組織中基質(zhì)細胞的生理特性，使基質(zhì)細胞初步表現(xiàn)出炎癥反應(yīng)特征。成纖維細胞是構(gòu)成乳腺組織重要的基質(zhì)細胞，其生長狀態(tài)的改變會直

2、接影響乳腺組織正常的結(jié)構(gòu)和功能，因此研究奶牛乳腺上皮細胞在炎性狀態(tài)下對基質(zhì)成纖維細胞生物特性和功能的功能影響對于奶牛乳腺炎的防治具有重要的意義。
　　金黃色葡萄球菌和大腸桿菌是引起奶牛乳腺炎主要的兩種細菌，脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)和脂磷壁酸(lipoteichoic acid，LTA)分別是這兩種導(dǎo)致奶牛乳腺炎的細菌主要毒力成分。本試驗以荷斯坦奶牛乳腺組織分離的原代乳腺上皮細胞作為研究對象，首先利用

3、LPS和LTA對乳腺上皮細胞進行炎癥誘導(dǎo)，確定了LPS和LTA炎癥誘導(dǎo)的最適濃度和最適時間，建立了體外誘導(dǎo)的炎性奶牛乳腺上皮細胞模型;然后通過體外間接共培養(yǎng)模式，以LPS和LTA體外誘導(dǎo)的炎性乳腺上皮細胞與正?；|(zhì)成纖維細胞共培養(yǎng)的方法模擬炎性上皮細胞影響成纖維細胞過程，研究炎性乳腺上皮細胞對基質(zhì)成纖維細胞活性、增殖、遷移、凋亡、炎性細胞因子分泌等生物學(xué)特性的影響，同時對導(dǎo)致這些特性發(fā)生變化的分子機制進行探究。結(jié)果表明，LPS和LTA誘

4、導(dǎo)的炎性上皮細胞均可促進了基質(zhì)成纖維細胞的激活，通過MAPK信號通路抑制成纖維細胞的增殖，通過WNT/β-catenin信號通路促進了成纖維細胞的遷移、同時增強成纖維細胞對TNF-α，CCL5，CXCL2，IL6，IL8等炎性相關(guān)因子的表達和分泌，誘導(dǎo)細胞外基質(zhì)蛋白Fibronection和CollagenⅠ的沉積。這些結(jié)果表明奶牛乳腺上皮細胞在炎性狀態(tài)下，通過內(nèi)環(huán)境對基質(zhì)成纖維細胞生炎癥響應(yīng)。這一結(jié)果為進一步研究乳腺基質(zhì)成纖維細胞在奶