口腔癌相關(guān)成纖維細(xì)胞對血管內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、研究背景:癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(carcinoma-associated fibroblasts，CAFs)是腫瘤-宿主界面微環(huán)境(tumor-host interface microenvironment)，中最重要的宿主細(xì)胞，具有獨(dú)特的生物學(xué)特性和功能。血管內(nèi)皮細(xì)胞(vascular endothelial cell，VEC)是血管生成的靶細(xì)胞，腫瘤血管新生受微環(huán)境中龐大精密而復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，過去的研究多集中于腫瘤細(xì)胞對其的調(diào)控作用

2、；新近研究發(fā)現(xiàn)，CAFs在腫瘤VEC的募集、增殖和血管芽的形成中發(fā)揮重要作用。本課題在原有研究基礎(chǔ)上，擬進(jìn)一步探討口腔CAFs對血管內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)特性的影響，目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)報道。 研究目的:通過建立CAFs和血管內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304交互作用模型系統(tǒng)：(1)研究口腔CAFs對ECV304細(xì)胞形態(tài)及活性的影響；(2)研究口腔CAFs對ECV304細(xì)胞遷移特性的影響。 研究方法:(1)用組織塊培養(yǎng)法獲得原代口腔CAFs

3、及正常成纖維細(xì)胞(normalfibroblasts，NFs)，建立口腔CAFs和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304相互作用模型，觀察CAFs對ECV304細(xì)胞形態(tài)及生長狀況的影響，并采用甲基噻唑基四唑(methyl-thiazolyl tetrazolium，MTT)比色實驗檢測口腔CAFs對ECV304細(xì)胞活性的影響。(2)采用細(xì)胞片刮除法檢測ECV304在CAFs條件培養(yǎng)基作用下隨機(jī)運(yùn)動能力的變化；同時采用微孔濾膜培養(yǎng)小室及雙室聯(lián)合培

4、養(yǎng)系統(tǒng)檢測CAFs對ECV304趨化性遷移能力的影響。 研究結(jié)果:(1)與CAFs直接共培養(yǎng)時ECV304細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化；與NFs相比，受CAFs作用的ECV304細(xì)胞活性在24h、48h時均明顯增強(qiáng)(P<0.05)；(2)與NFs相比，CAFs作用24h下，ECV304細(xì)胞隨機(jī)遷移數(shù)量增多(P<0.05)且最大遷移距離有增大趨勢；受CAFs作用12h、24h時，ECV304趨化性遷移能力明顯增強(qiáng)(P<0.05)，更多ECV3