成纖維細胞生長因子10對體外培養(yǎng)的大鼠結(jié)膜上皮細胞的生物學(xué)作用研究.pdf

1、目的：觀察FGF10 對體外培養(yǎng)的大鼠結(jié)膜上皮細胞增殖、凋亡及粘蛋白表達的影響。
　　 方法：取SD 大鼠（5 只）結(jié)膜以組織塊貼壁方式進行結(jié)膜上皮細胞的原代培養(yǎng)及傳代，細胞角蛋白（cytokeratin，CK）染色鑒定；取第2～3 代細胞加入1、10、100及200 ng/mL FGF10 及10ng/mL FGF2 分別作用24、48 小時后用MTS 法檢測細胞增殖；Annexin V/PI 染色，流式細胞法檢測72 小時后

2、的細胞凋亡情況；RT-PCR 和Western-blot 檢測MUC1，MUC4 和MUC5AC 的mRNA 表達和蛋白合成。
　　 結(jié)果：24 和48 小時后，F(xiàn)GF10 各組（10，100 和200ng/mL）及FGF2 組具有顯著的促細胞增殖作用（p < 0.05），且兩者無明顯差異，其中FGF10 顯示出時間依賴性和劑量依賴性；流式細胞法檢測結(jié)果顯示，F(xiàn)GF10 和FGF2 作用72 小時后，實驗各組均能夠降低細胞凋亡率

3、，但與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p > 0.05）；FGF10 和FGF2 均能夠促進粘蛋白MUC1、MUC4 和MUC5AC 三種粘蛋白mRNA 的表達和蛋白合成（p < 0.05），其中以100 ng/mL 組作用最顯著，F(xiàn)GF10（100 ng/mL）與FGF2相比作用更加明顯（p < 0.05）。
　　 結(jié)論：FGF10 具有促進結(jié)膜上皮細胞增殖，增加MUC1、MUC4 和MUC5AC 的表達與合成等作用，可為一些眼表